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去遮盖对小鸡FDM后极部巩膜TIMP-2基因表达的影响 |
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作者:吴文灿 吕… 文章来源:温州医学院附属眼视光医院 点击数:1673 更新时间:2005/6/12 12:19:24
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目的:研究小鸡形觉剥夺性近视恢复眼(RFDM)后极部巩膜基质金属蛋白酶2特异性组织抑制剂(TIMP-2)基因表达以揭示FDM后极部巩膜MMP-2酶活性特异性增高及ECM主动重塑的可能机制。
方法:1 d龄来亨雏鸡随机分为形觉剥夺性近视眼(FDM)组、RFDM组、自身对照组与正常对照组。以半透明塑料眼罩分别单眼遮盖4、7、14、21、30 d以制备小鸡FDM动物模型(FDM组),当遮盖7、21 d时随机选取小鸡分别去遮盖1、4 d以制备RFDM动物模型(RFDM组);上述实验小鸡对侧眼作为各组自身对照眼(自身对照组);同时随机选取同龄、非遮盖小鸡作为各组的正常对照组。上述各实验组每组小鸡15只。于各预定实验时间去头法处死小鸡,取后极部巩膜,冰冻切片,常规HE染色进行组织病理学观察,同时采用免疫组化法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)一步法分别检测上述各组小鸡后极部巩膜TIMP-2蛋白质与mRNA表达。
结果:HE染色结果显示, FDM组小鸡眼后极部巩膜纤维层明显变薄与纤维化,细胞排列不规则,而软骨层相对增厚,双核细胞与不规则细胞明显增多,呈增殖活跃状态;免疫组化结果显示,正常对照组、自身对照组后极部巩膜大量成纤维细胞胞浆、软骨细胞软骨囊与细胞膜及其周围部分细胞外基质(ECM)TIMP-2染色阳性;FDM组小鸡阳性染色明显减少,FDM 21 d组仅少量双核细胞、不规则细胞呈阳性染色,ECM无阳性表达;而遮盖7 d后去遮盖4 d组与其正常对照组、自身对照组基本相似,遮盖21 d后去遮盖4 d组TIMP-2阳性染色细胞较遮盖21 d组明显增多,但其周围ECM未见明显阳性表达颗粒;RT-PCR结果表明,各FDM组小鸡后极部巩膜TIMP-2 mRNA水平显著降低,且呈明显时间依赖性,与相应自身对照组、正常对照组比较差别均有统计学意义(P<0.01);遮盖7 d后去遮盖1 d 其mRNA表达明显上调,去遮盖4 d后恢复至其正常对照组、自身对照组水平(P>0.05)。遮盖21 d后去遮盖1 d其后极部巩膜TIMP-2 mRNA表达亦上调,去遮盖4 d后尽管显著增高,但仍明显低于其正常对照组、自身对照组水平(P<0.01)。
结论:形觉剥夺可明显下调小鸡后极部巩膜TIMP-2蛋白质及mRNA表达,去遮盖后上述改变可得到部分或全部逆转,表明TIMP-2抑制与小鸡FDM后极部巩膜MMP-2酶活性调节及巩膜ECM重塑密切相关。
关键词 形觉剥夺性近视眼;基质金属蛋白酶-2特异性组织抑制剂;巩膜;小鸡
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会议投稿录入:wuwencan 责任编辑:毛进 |
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