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| PDLLA/GA抑制青光眼滤过手术后瘢痕形成的实验研究 |
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作者：李运 文章来源：山东省立医院 点击数：1303 更新时间：2005/6/13 14:10:27 
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| 中文摘要
【目 的】
研究动物青光眼滤过手术后瘢痕形成的机理，探讨高分子生物材料聚乳糖膜PDLLA/GA，抑制青光眼术后瘢痕形成的机理，以寻求防治青光眼滤过术后瘢痕形成理想途径。
【方 法】
新西兰大白兔26只(52眼)，随机分为两组，聚乳酸组(24眼)和对照组(24眼)；非手术组2只。常规行小梁切除术, 每只兔随机一眼行小梁切除术；另一眼常规行小梁切除术后, 将4×4mm聚乳酸膜铺于巩膜瓣之间。分别于术后3d，1w，2w，4w，8w，12w，20w，24w观察眼压、结膜滤过泡、炎症反应，并于每个时间段随机除死3只兔子，行组织病理学检查，免疫组化检测MMP-9、TIMP-1、 PCNA和胶原Ⅳ及用RT-PCR 技术检测CTGF的表达。
【结 果】
1、眼前节的表现：术后1w、2w对照组结膜充血较实验组明显（P<0.05），术后4w两组结膜充血皆消退；角膜透明度、前房深度、前房炎症反应、前房积血、晶体透明度的改变两组比较无统计学意义。
2、两组滤过泡在术后1ｗ最为明显，PDLLA/GA组明显高于对照组（P<0.01），之后，对照组比实验组明显缩小，比较有显著性差异（P<0.05）。
3、术后各期两组眼压均明显低于术前（P<0.01）；两组眼压于术后1ｗ明显降低，2ｗ以后，对照组眼压明显高于实验组（P<0.01） 。
4、组织病理学H-E染色检查表明：实验组炎症细胞、异物反应、成纤维细胞增生、胶原组织增生较对照组少，滤过泡较对照组明显，且维持时间较长。
5、成纤维细胞的细胞核增殖抗原免疫组化显示，对照组滤过泡处PCNA明显升高，且于术后3天达到峰值，于术后2w达到基线水平。而对照组于术后1w达到峰值，其峰值是对照组的1/5。
6、胶原Ⅵ免疫组化显示：两组术后表达皆有提高，术后7天两组皆达到峰值，但实验组较对照组表达少，两组分别于术后2w和4w保持在同一较高水平。
7、Masson染色： 光镜下观察滤过道新生胶原纤维量，结果显示，两组皆有不同程度的新生胶原存在，两组同时于术后3d升高，且达到相同的峰值，之后实验组缓慢下降，4w开始一直维持在较高的水平。而对照组一直到术后4w仍维持在最高的水平，之后缓慢下降，于术后12w维持在与实验组一致水平。对照组术后1w到8w新生胶原纤维量高于实验组（P<0.05）。
8、MMP-9和TIMP-1
正常结膜及巩膜MMP-9的表达轻微，在术后3d开始有较淡的棕色颗粒出现，随时间延长表达逐渐增强，呈片状分布，至1w达到高峰，对照组和实验组光密度值分别较术前高1.8倍和1.9倍（P<0.05），这种高强度表达可并维持约 1周时间后逐渐减弱，但至一定程度后不再继续减弱，其表达一直在术后20w仍强于正常组织。实验组于自术后3d至20w MMP-9光密度值明显高于对照组（P<0.05）。
滤过道病理切片苏木素-伊红染色和TIMP-1免疫组化染色后，光镜下观察9 TIMP-1的表达情况。两组术后较术前皆有轻度的提高，实验组于对照组皆于术后1w得到峰值，分别较术前提高1.1倍和1.05倍（P>0.05）；皆于术后4w回到基线水平。
9、RT-PCR CTGFmRNA
与实验组比较，对照组CTGFmRNA在术后表达较强，两者比较有显著性差异（P<0.05），术后1w，两组的CTGFmRNA表达达到峰值，持续约1w之后下降。对照组CTGFmRNA的表达较术前高2.8倍，而实验组CTGFmRNA的表达较术前高2.0倍，实验组与对照组比较，CTGFmRNA的表达低30～40%,有显著性差异（P<0.01）。
【结 论】
兔眼青光眼滤过手术模型中应用PDLLA/GA膜，可以有效的延长滤过泡生存时间，降低眼内压，同时可以减少成纤维细胞和胶原蛋白的增生，影响细胞外基质中MMP-9，和TIMP-1的表达，减少了瘢痕形成中CTGF的表达，说明其具有抑制青光眼滤过术后的瘢痕形成的作用。
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| 会议投稿录入：sammieagle 责任编辑：毛进 |
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