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兔出血性视网膜脱离的细胞凋亡及其相关基因表达 |
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作者:刘玮 王雨… 文章来源:西安第四军医大学西京医院眼科 点击数:1350 更新时间:2005/6/13 17:41:33
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兔出血性视网膜脱离的细胞凋亡及其相关基因表达
刘玮 王雨生 惠延年
西安第四军医大学西京医院眼科,710032
中文摘要
目的
出血性视网膜脱离是由于各种原因所致的、源于脉络膜和/或视网膜循环的多量血液积聚于视网膜下,造成视网膜神经感觉层和色素上皮层分离,从而导致视力丧失的眼部疾病。由于在人眼上较难获得合适的HRD标本,我们通过兔眼HRD模型,观察HRD后视网膜的组织病理学改变,探讨HRD的致病机制。通过细胞凋亡检测试验和进行bax和p53的免疫组化及原位杂交实验,探讨凋亡在出血性视网膜脱离中的作用,从而为HRD的进一步研究和治疗打下基础。
方法
1.动物模型的建立:经兔眼玻璃体腔向视网膜下注入自体抗凝血0.2mL建立HRD模型,作为HRD组;注入含肝素钠生理盐水0.2mL,作为RD对照组,设立正常对照组。
2.HRD模型视网膜标本在术后1h、1d、3d、7d、10d、14d、28d进行光学显微镜观察,测量视网膜神经感觉层厚度和节细胞计数。TUNEL法进行细胞凋亡检测,原位杂交和免疫组织化学方法检测视网膜组织中bax和p53表达,随机观察光镜下视网膜同一部位50个外核层细胞,将阳性细胞占细胞总数的百分比进行定量分析。
结果
1.视网膜神经感觉层厚度及神经节细胞计数:RD组与正常对照组比较无明显变化。HRD组14d、28d时明显小于RD组及正常对照组。
2.细胞凋亡检测:HRD后1d外核层出现阳性细胞,持续到3d;7d内核层出现阳性细胞,14d时达到顶峰,28d时仍可见阳性细胞。
3.HRD中bax和p53表达:1d可见光感受器细胞层bax/p53表达阳性细胞,3d时达到顶峰,此后逐渐下降。
结论
1.HRD视网膜光感受器细胞在14d后基本消失,视网膜变薄,节细胞减少,HRD对视网膜的损伤逐步由1级神经元发展到2级、3级神经元,是涉及视网膜全层的严重的不可逆损害。
2.HRD凋亡的发生由光感受器外核层逐渐向内核层进展,bax和p53的表达可能是造成视网膜细胞死亡的因素之一,凋亡是HRD造成视功能损害的重要机制。
3.HRD治疗时机选择对于其预后很重要,最好在1周内实施干预措施。
关键词 视网膜脱离;眼出血;疾病模型,动物;凋亡;bax;p53。
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会议投稿录入:wendaowei 责任编辑:毛进 |
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