【摘要】 【目的】 探讨线粒体释放的细胞色素c(cytochrome C, cytC)、凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor, AIF )在过氧化氢(Hydrogen peroxide,H2O2)诱导的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium, hRPE)细胞凋亡信号途径中的作用及重组人促红细胞生成素(recombination human erythropoietin, rhEPO)抑止hRPE细胞氧化损伤的机制。【方法】 体外培养的hRPE细胞中分别加入400和600、800、1000μmol/L H2O2培养3h, 建立氧化损伤模型,并用rhEPO进行干预。采用瑞氏-吉姆萨(Wright-Giemsa)染色法观察干预前后hRPE细胞凋亡的形态学变化,以免疫组织化学方法检测AIF和cytC在细胞内的分布情况,免疫印迹(western blotting)法检测细胞线粒体中AIF和cytC蛋白浓度的变化。【结果】 H2O2处理后,细胞出现典型的凋亡形态学改变;随H2O2浓度升高,hRPE线粒体中cytC、AIF浓度下降,胞浆中cytC及胞核内AIF逐渐增加;加用rhEPO干预后,细胞凋亡指数降低(p<0.05),线粒体中AIF及cytC的释放明显受到抑止(p<0.05)。 【结论】 H2O2可通过线粒体途径诱导hRPE细胞凋亡,推测rhEPO可能通过抑止线粒体释放cytC、AIF拮抗H2O2诱导的凋亡。
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