| 目的 探讨Balb/c小鼠感染单纯疱疹病毒－1（HSV-1）后，基质金属蛋白酶－2、9及组织金属蛋白酶抑制剂TIMP-1表达变化及其在单疱病毒角膜炎病程中所起的作用。方法 6 至8 周龄雌性BalB/c小鼠40只, ,实验前双眼前节检查正常。将小鼠随机分为实验组和对照组，每只鼠均取右眼为实验眼。显微镜下十字交叉搔刮右眼角膜上皮后点滴Ⅰ型单纯疱疹病毒( herpes simplex virus－Ⅰ)5μl (105PFU)于角膜上,按摩眼球并滞留20s。感染眼每日用氯霉素滴眼液滴眼。分别在HSV-1感染后的2、7、14天，用颈椎脱臼法处死两组小鼠，迅速摘除右眼球，做好时间标记，用中性福尔马林固定，常规脱水，二甲苯透明，进行石蜡包埋，3um连续切片，常规脱蜡，捞片，60℃烤片，过夜后行免疫组织化学染色。阴性对照以PBS代替兔抗小鼠MMP-2、MMP-9、TIMP-1多克隆抗体，方法照旧。通过免疫组织化学染色方法和计算机图像分析系统检测小鼠感染HSV-1后MMP-2、MMP-9、TIMP-1在角膜中的分布及其平均吸光度值。探讨它们在单疱病毒性角膜炎（HSK）发展过程中所起的作用。结果 光镜下观察免疫组织化学染色切片，抗MMP-2抗体、抗MMP-9抗体、抗TIMP-9抗体染色阳性的细胞表现为胞质程度不同、基本均匀的棕黄色粗大颗粒反应，反之则为染色阴性。免疫组织化学染色结果：正常角膜中,MMP－2及TIMP－1定位于上皮细胞层,尤其是基底膜部位,而MMP－9 弥散于基质层中,阴性对照无染色。实验组HSV－1 角膜感染后第2 天,可见MMP－2、－9及TIMP－1的染色位于上皮下基质层树枝状损害区或上皮抓痕处的炎性细胞和角膜细胞中。第7 天MMP－2 、－9 及TIMP－1的染色较第2 天减弱。第14天角膜基质全层特别是坏死区、近溃疡区及邻近溃疡的上皮细胞可见MMPs 及TIMPs 的阳性染色显著增加,其中中性粒细胞呈强阳性。对照组MMP-2、MMP-9及TIMP-1阳性染色明显弱于实验组。结论 MMP-2、9促进角膜溃疡、角膜溶解及新生血管形成，TIMP-1的作用刚好相反。MMP与TIMP表达的综合平衡对于单纯疱疹病毒性角膜炎的溃疡形成及发展有重要的作用。 |
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