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| 真空冷冻干燥保存兔角膜内皮细胞的光/电镜酶组织细胞化学实验研究 |
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作者：杨宏伟 文章来源：中国医科大学第二临床学院眼科 110004 点击数：2952 更新时间：2004/1/12 
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| 目的 通过光镜、电镜酶组织细胞化学技术测定兔角膜内皮细胞酶的活性，探讨真空冷冻干燥保存法（冻干法）对于兔角膜内皮细胞活性的影响。
方法 按随机及配对原则将兔眼分为3组，分别为新鲜对照组、冷冻对照组、冻干实验组。冷冻对照组为对离体兔角膜片进行深低温冷冻保存；冻干实验组将离体的角膜组织经过深低温冷冻使组织内的水分凝结成固态，然后进行真空冷冻干燥保存，即在真空条件下使固态的水升华。冻干的角膜片可以在冰箱及室温下保存，具有便于运送，节省资金等优点。将冷冻及冻干保存的兔角膜片分别复水及复温后，与新鲜角膜片同时进行内皮细胞三磷酸腺苷酶（Na+-K+ATPase）、琥珀酸脱氢酶（SDH）的光镜及电镜酶组织细胞化学染色，应用图像分析系统进行积分光密度值的测定，对三组样本进行两两均数t检验的统计学分析。观察三组酶的活性是否有差异。
结果 在新鲜对照组、冷冻对照组、冻干实验组中，角膜内皮细胞Na+-K+ATPase 及SDH的酶组织化学染色在光镜观察下均呈阳性反应。三组样本在新鲜对照组与冷冻对照组间SDH酶的平均积分光密度值（IOD）差异无统计学意义 (P>0.05)。实验组与对照组IOD差异具有统计学意义(P<0.05)。三组样本Na+-K+ATPase的IOD差异具有统计学意义(P<0.05)，冻干组活性较低，新鲜组活性高。电镜酶组织细胞化学染色见三组样本角膜内皮细胞膜上均有电子致密颗粒沉着。
结论 冻干保存法是可使离体角膜内皮细胞保持一定的活性。与新鲜及冷冻保存的兔角膜相比，活性较低。但可以推测冻干法经过进一步地研究，改进冻干工艺，有可能成为一种新的角膜长期保存方法。 |
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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