目的 细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)是细胞生长的微环境,不仅直接支持细胞和组织,而且影响细胞的形态,调控细胞正常代谢、迁移、增殖、分化及信息传递,在PVR的发生、发展中起着极重要作用。层粘连蛋白(laminin,LN)作为ECM的一种成分,作为粘附因子介导视网膜色素上皮细胞、内皮细胞、巨噬细胞等粘着于Ⅳ型胶原(Ⅳcollagen,ⅣC),并使之铺展,促进细胞增殖和迁移,并且转化成为成纤维细胞,进一步参与组织修复和疤痕的形成。ⅣC是ECM的另一种成分。对细胞有趋化作用,能改变细胞表型促进细胞增生。本次实验将蛇毒降纤酶用于外伤性增生性玻璃体视网膜病变实验模型中,观察蛇毒降纤酶对外伤性增生性玻璃体视网膜病变玻璃体增殖膜中LN、ⅣC的影响。方法 对20只兔子采用兔眼后节穿通伤加注血法和/或加蛇毒降纤酶制备实验模型,随机分成正常对照组(5眼)、生理盐水组(5眼)、全血组(10眼)、蛇毒降纤酶0.03u治疗组(10眼)、蛇毒降纤酶0.06u治疗组(10眼)。兔臀部肌肉注入麻醉后,于颞侧1:00方位距角膜缘后3mm处经瞳孔直视下用7号针向着球心垂直刺入玻璃体腔抽取玻璃体0.3ml。生理盐水组:抽取生理盐水0.3ml注入玻璃体腔;全血组:从兔耳廓静脉取0.3ml血注入玻璃体腔;蛇毒降纤酶浓度0.03u组:玻璃体腔注入兔耳廓静脉血0.3ml﹢蛇毒降纤酶0.1ml(含0.03u蛇毒降纤酶);蛇毒降纤酶浓度0.06u组:玻璃体腔注入兔耳廓静脉血0.3ml﹢蛇毒降纤酶0.1ml(含0.06u蛇毒降纤酶)。伤口不缝合,滴0.25%氯霉素眼液于结膜囊内,兔臀部肌肉注射青霉素80万u,40天后处死5组动物并迅速摘出双眼球。向眼球玻璃体腔内注入10%福尔马林,放入10%福尔马林液中固定1周,经角膜、视神经水平面切开眼球,逐级酒精脱水,浸蜡、石蜡包埋,切片行常规HE染色及免疫组织化学染色。利用DMR+Q550型病理图像分析仪,根据一个高倍镜下阳性染色面积比值(每个视野的阳性染色面积与一个视野总面积之比)的多少进行统计。利用SPSS11.5统计软件处理。检验水准以P<0.05为有统计学意义。结果 蛇毒降纤酶浓度0.06u组中PVR增殖组织中LN、ⅣC阳性面积比值少于蛇毒降纤酶浓度0.03u组;蛇毒降纤酶浓度0.03u组PVR增殖组织中LN、ⅣC阳性面积比值少于全血组。全血组、蛇毒降纤酶浓度0.03u组和蛇毒降纤酶浓度0.06u组三组PVR增殖组织中LN、ⅣC阳性面积比值比较差异有极显著性(P<0.01);全血组与蛇毒降纤酶浓度0.03u组LN、ⅣC阳性面积比值比较差异有极显著性。(P<0.01);全血组与蛇毒降纤酶浓度0.06u组LN、ⅣC阳性面积比值比较差异有极显著性。(P<0.01)。我们同时发现,蛇毒降纤酶浓度0.06u组形成的PVR程度低于蛇毒降纤酶浓度0.03u组;蛇毒降纤酶浓度0.03u组形成的PVR程度低于全血组。全血组、蛇毒降纤酶浓度0.03u组、蛇毒降纤酶浓度0.06u组这三组PVR程度差异有显著性意义(P<0.05)。结论 蛇毒降纤酶能够降低PVR增殖膜中LN、ⅣC的阳性表达,抑制PVR的发生、发展。 |