目的:观察电场对人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelial, hRPE)细胞合成单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的作用,为增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy, PVR)发病机制的研究提供新思路。方法:培养的hRPE细胞暴露于电场强度为6V/cm的直流电场中,未受电场作用的细胞作为对照;分别于电场暴露后1、2、4、6h采用免疫组织化学及原位杂交法检测细胞中MCP-1的表达情况;同时采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA )检测培养液上清中MCP-1蛋白的表达量。结果:对照组细胞MCP-1表达不明显,培养液上清中MCP-1蛋白仅有微量表达,表达量为(0.012±0.008)ng/ml;电场暴露1h后,hRPE细胞中即出现MCP-1的阳性表达,表现为免疫组化及原位杂交后细胞胞浆中浅棕黄色着染,并随电场暴露时间延长,此表达逐渐显著,至6h细胞胞浆呈深棕色;暴露1h后培养液上清中MCP-1蛋白含量为(0.025±0.011)ng/ml,随时间延长而升高,至6h达(0.098±0.027)ng/ml,与对照组有显著性差异﹙P<0.01=,并与电场暴露时间成正相关﹙r<0.01=。结论:电场暴露可刺激hRPE细胞产生MCP-1,而MCP-1与巨噬细胞及淋巴细胞间具有循环作用,因此电场与眼内炎性反应之间可能存在相互影响,该过程可能在PVR发生过程中发挥作用。 |