|
| 机械牵拉对培养人视网膜色素上皮细胞丝裂素活化蛋白激酶信号转导通路的影响 |
|
作者：侯 旭，惠… 文章来源：西安 第四军医大学西京医院眼科，全军眼科研究所 710032 点击数：1803 更新时间：2005/7/1 9:12:41 
|
|
| 目的：视网膜色素上皮细胞（RPEs）位于视网膜神经感觉层下，细胞间以紧密连接构成单一细胞层，是血－视网膜外屏障的结构基础。由于神经上皮层和色素上皮层在胚胎发育时存在间隙，而玻璃体和神经上皮层之间存在不同强度的附着和粘连。当玻璃体变性液化，可能造成对神经上皮层的牵拉作用，从而将力传导在色素上皮层。这种对于RPE细胞牵拉力的作用，是否造成了损伤，是否是视网膜脱离发病前的启动因素之一，与RPE细胞的移行、增生，以至于眼内增生性病变的发生是否相关，目前还没有明确的认识。我们设法通过一个细胞培养的受力模型，模拟近似的体内RPE细胞的力作用环境。以丝裂素活化蛋白激酶(Mitogen activated protein kinase,MAPK)信号转导通路为研究指标，观察RPE细胞在力刺激和应急状态下的信号转导变化。为进一步研究力作用下的RPE细胞的增生、分泌，以及多种细胞因子之间复杂的调控网络提供依据和指导。也为疾病的预防和治疗寻找突破口。方法：胶原溶液中加入磁珠孵育，胶原即吸附在磁珠上。磁珠悬液加入附壁生长的细胞孵育。洗去未结合的磁珠颗粒，给细胞施加垂直方向磁场。距离细胞培养板底2cm磁场强度为400Gauss。细胞在垂直力的作用下被拉伸。用WESTERN BLOT的方法检测MAPK(ERK、JNK、p38)信号分子从3mins到30mins的表达变化和p38的特异性阻断剂（SB203580）的干预作用；用荧光染色的方法观察活化型p38的表达变化。结果：光镜下可见细胞边界清晰，隐约可见细胞核。细胞表面附着大量的磁珠颗粒，呈点状和团块状分布，中央多，周边部少。牵拉刺激细胞之后，总ERK、JNK和p38在RPE细胞中有表达。活化型ERK、p38有表达。活化型JNK未见表达。活化型ERK的表达无显著变化，而活化型p38在受力前表达很低，但受力5mins后即显著增高。SB203580可以抑制机械牵拉造成的P38的磷酸化。荧光染色分析也显示牵拉刺激可以增加活化型p38的荧光量。结论：机械牵拉可以对RPE细胞产生刺激作用，而这个作用可能部分的通过p38信号转导途径。
|
|
|
| 会议投稿录入：aya610 责任编辑：毛进 |
|
|
上一篇会议投稿： 电场对人视网膜色素上皮细胞合成单核细胞趋化蛋白-1的作用
下一篇会议投稿： 一期玻璃体切除术治疗人工晶状体眼视网膜脱离 |
|
|
| 【字体：小 大】【发表评论】【加入收藏】【告诉好友】【打印此文】【关闭窗口】 |
|
网友评论：（只显示最新10条。评论内容只代表网友观点，与本站立场无关！）