| 目的：研究大鼠角膜新生血管的差异基因表达谱，并用原位杂交和western blot方法对差异表达基因MMP-13的mRNA和蛋白质水平表达进行进一步证实。
方法：1.对38只SD大鼠进行双眼角膜缝线，创建CNV动物模型。缝线后1d、4d、7d、12d、24d和90d进行光镜观察及角膜铺片CNV定量检查。2. 40只SD大鼠实验眼角膜缝线后4d和12d处死。用有5705条基因的Oligo 芯片检测角膜组织的基因表达谱，并对差异表达基因进行分析。3. 30只SD大鼠行实验眼角膜缝线后1d、4d、12d、24d、90d 处死,用原位杂交方法检测MMP-13mRNA的表达。4. 18只SD大鼠双眼角膜缝线后1d、4d、7d、12d和24d处死，用western blot方法检测MMP-13的蛋白质表达。
结果：1.裂隙灯显微镜观察：缝线后1d出现角膜水肿，角膜缘血管网扩张；4d出现新生血管芽；12d新生血管密度及管径达到高峰值；24d新生血管退行。角膜铺片CNV定量:缝线后1～12d，CNV面积逐渐增大，12d时达高峰值（8.70±0.76）mm2。2.缝线后4d，5705条基因中，差异表达基因为57条，其中上调29条，下调28条（ratio>4或<0.25）。上调明显的基因有SCYA2、S100A9、MMP-3、TIMP-1、IL1R2等；下调明显的基因有GALE、GATM和GALD1等。缝线后12d，差异表达基因为38条，其中上调34条，下调4条。上调明显的基因有MMP-3、MMP-12、MMP-13、TIMP-1、SCYA2、S100A9等。下调明显的基因有ALDH1A1等。4d和12d上调的基因明显多于下调的基因。3. 正常角膜中未见MMP-13mRNA表达。缝线后4d ，MMP-13mRNA在角膜基质细胞及炎症细胞胞浆内大量表达，4～12d角膜内MMP-13mRNA阳性染色面积明显增大(P<0.01)，24d阳性染色面积下降。4.缝线后7d及12d， MMP-13前体状态蛋白条带积分光密度值明显减低；缝线后1～12d,MMP-13活性状态的积分光密度值逐渐增大（P<0.05），24d积分光密度值减低。
结论： MMP-3、MMP-12、MMP-13、TIMP-1、SCYA2、S100A9等基因主要参与CNV形成；缝线诱导的CNV中，MMP-13mRNA表达主要位于角膜基质细胞及炎症细胞胞浆内。MMP-13在DNA、mRNA以及蛋白质水平表达基本一致，证明其在CNV形成中具有重要作用。
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