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| 低能量TTT预照射与Hsp70表达对TTT照射视网膜 |
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作者：孙悦 王… 文章来源：上海交通大学附属瑞金医院 眼科上海瑞金二路197号 200025 点击数：1112 更新时间：2006/5/9 10:29:58 
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| 目的：低能量TTT预照射视网膜20小时后再进行较高能量TTT照射，探讨低能量TTT预照射是否对视网膜神经上皮层存在保护效应，并讨论该过程中视网膜Hsp70高表达的相关性。
对象与方法：挪威棕色大鼠（norway brown rat，NB rat）按照随机原则分为5组。A组：TTT低能量（60mW）照射后20小时给予第二次TTT高能量（80mW）照射，12小时后间接眼底镜观察视网膜表现，并行FFA、ICGA造影检查，然后麻醉、断颈处死大鼠，迅速摘除眼球行病理学检查，并通过免疫组化、原位杂交法以及Western Blot蛋白质半定量法检测视网膜组织内Hsp70蛋白的表达情况，以TUNEL法检测视网膜组织内原位凋亡。免疫组化法与Western Blot蛋白质半定量法检测活性Caspase 3的表达。B组：未经低能量TTT照射，直接进行TTT高能量（80mW）照射，12小时后观察上述指标。C组：TTT低能量（60mW）照射，36小时后对大鼠视网膜进行观察。D组：除不行TTT照射外，其余操作均同A、B、C组。E组：不作任何处理，正常对照。
结果：A组大鼠眼底均未见肉眼可辨的改变，FFA检查可见部分大鼠存在荧光素渗漏，ICGA未见异常荧光染料积存。以上结果与B、C组观察所见无明显差异。D、E组未见异常改变。各组病理学切片HE染色也未见组织结构改变，光镜、电镜下均未见组织坏死。免疫组化法检测各组Hsp70蛋白表达发现视网膜内外丛状层阳性，且A组明显高于B组、C组。B、C组均明显高于D组和E组对照组。原位杂交法检测结果示A、B、C组均可见视网膜内外丛状层阳性，且A组明显高于B、C组。Western Blot检测结果示各组视网膜神经上皮层内均存在Hsp70蛋白的高表达，A组明显高于B组和C组。B、C组均明显高于D组和E组。TUNEL结果示TTT照射后各组视网膜内、外核层均可见不同程度细胞凋亡，并且以外核层更多见，但神经节细胞层未见细胞凋亡。其中B组凋亡率明显高于A组和C组，D、E两组未见明显凋亡。各受照射组视网膜神经上皮层组织内活性Caspase 3免疫组化均有不同程度阳性，且B组活性Caspase 3表达明显高于A组和C组，D、E组未见明显表达。
结论：高能量TTT照射后视网膜神经上皮层的内外核层都存在细胞凋亡，但先予低能量TTT预照射，可减轻其对视网膜的损害，同时视网膜神经上皮层内Hsp70高表达。推测低能量TTT预照射诱导了视网膜神经上皮自身细胞内Hsp70蛋白的高表达，保护受照射区视网膜，减轻该区域视网膜的损害。
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| 会议投稿录入：阿亚 责任编辑：毛进 |
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