目的 探讨羊膜移植对小鼠角膜1型单纯疱疹病毒 (herpes simplex virus type 1,HSV-1) 感染后发生角膜基质炎(herpetic stromal keratitis , HSK)的角膜中明胶酶(Gelatinases)的活性表达变化的影响,探讨羊膜移植对HSK的治疗作用及其机制。
方法 将5 0只Balb/c小鼠随机分为实验组和对照组,每组各25只,105pfu HSV-1病毒(SM44株)感染小鼠角膜,制作HSK小鼠模型。对实验组小鼠右眼角膜行羊膜移植术,对照组角膜不行羊膜移植术。在羊膜移植术后第0 ,2d,7d,14d,21d处死动物取角膜。应用明胶酶谱(Gelatin Zymography)方法和计算机图像分析系统检测小鼠角膜明胶酶的酶活性表达的变化。
结果 羊膜移植组角膜上皮病变程度、基质混浊程度和新生血管发生明显低于对照组(p<0.05)。角膜感染HSV-1后,明胶酶谱显示:实验组小鼠角膜中酶原形式的pro-MMP-9(分子量约为92kDa)在AMT后第2,14,及21天表达增强。活性形式的MMP-9(分子量约为82kDa)在AMT后各时间点均有表达,但在第2天,第14天及21天表达增强。pro-MMP-2(分子量约为72kDa)条带在AMT后各时间点均有表达。而MMP-2活性条带(分子量约为62kDa)则出现在AMT后14天和21天。
对照组小鼠角膜中明胶酶的表达变化情况跟实验组类似,但是,MMP-2活性各时间点均较实验组为强(P<0.05)。而MMP-9的活性在羊膜移植后第2天(P<0.01),第14及21天(P<0.05)均较实验组为强。
结论 羊膜移植对HSV-1感染小鼠角膜后引起的坏死性角膜基质炎形成的角膜上皮缺损和角膜基质溃疡有明显的修复作用,这种作用的机制可能是通过抑制明胶酶的活性表达而实现的。
关键词 羊膜移植(AMT);单纯疱疹性角膜基质炎(HSK);明胶酶(MMP-2,9)
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