目的:
小鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)进行阈值上、阈值与阈值下经瞳孔温热疗法(transpupillary thermotherapy,TTT),分析不同能量参数TTT对CNV的治疗效果及相应的视网膜脉络膜组织改变,进一步评估临床阈值下TTT治疗CNV的可行性及安全性,为临床合理设置激光参数提供依据。
方法:
1 正常C57BL/6J小鼠36只(36眼),氪红激光光凝建立CNV模型。6只于光凝后6天,行FFA检查、病理学检查、FVIIIR:Ag免疫组化检测。
2. 余下30只诱导CNV的小鼠,分为5组,每组6只,氪红激光诱导CNV后6天,分别给予阈值上、阈值、阈值下TTT治疗。各组激光参数如下:A组:光斑直径1.2毫米,激光照射功率为60mW,照射时间60s;B组:光斑直径1.2毫米,激光照射功率为50mW,照射时间60s;C组:光斑直径1.2毫米,激光照射功率为50mW,照射时间30s;D组:光斑直径1.2毫米,激光照射功率为50mW,照射时间15s;E组:不予治疗。TTT治疗CNV后7天,FFA后摘除眼球做病理学检查、FVIIIR:Ag免疫组化检测。
3. 测量分析各组光镜下CNV复合体的相对厚度,实验结果采用方差分析、q检验和SPSS11.0统计软件进行数据处理。
4. 正常C57BL/6J小鼠16只(16眼),分为4组,观察阈值上、阈值、阈值下TTT对视网膜脉络膜的影响,各组激光参数同前。
结果:
1.CNV的诱导 正常C57BL/6J小鼠,氪红激光光凝诱导CNV后6天,FFA已可见到CNV荧光渗漏,14天时,CNV荧光渗漏更明显。组织学显示光凝后6天, 光斑区视网膜下形成瘢痕灶,瘢痕灶内有细胞排列成不规则管腔样结构。 光凝后14天,瘢痕灶内可见大量的新生血管。
2.TTT对CNV的抑制效果 实验性CNV行TTT治疗后7天时,阈值上、阈值、阈值下各组能量,FFA检查均显示损伤部位高荧光渗漏。光镜下和FVIIIR:Ag免疫组化均显示,TTT治疗后,阈值和阈值下能量组,CNV复合体内仅见少量CNV,显著的纤维瘢痕形成;阈值上能量组,新生血管管腔未见明显减少。TTT治疗后CNV复合体厚度统计学分析。未治疗组,CNV复合体的平均相对厚度为4.48±0.80。TTT治疗组CNV复合体的平均相对厚度分别为4.33±0.39、2.49±0.16、2.23±0.25、2.46±0.18,统计学结果显示,与未治疗组相比TTT治疗后,阈值上能量组CNV复合体的相对厚度减少不明显(P>0.05),阈值能量组和阈值下能量组CNV复合体的相对厚度明显减小(P<0.01)。
3.TTT对神经视网膜层的损伤 阈值下TTT时,已见到部分光感受器外节断裂;随TTT能量增大,神经视网膜受损伤加重,可出现光感受器外节断裂、部分缺失,外核层、内核层紊乱。
结论:
TTT治疗可采用视网膜神经感觉层无明显损害的能量设置,闭塞新生血管,有效减小实验性CNV复合体厚度。阈值下TTT,眼底镜下视网膜尚无明显变化时,视网膜光感受器已发生依赖能量变化的组织学改变。若TTT能量过大,可导致视网膜损害加重,临床选用能量设置需谨慎,否则将引起患者视力的严重下降。TTT治疗能量的窗口狭窄,临床选用能量设置需谨慎,否则将引起患者视力的严重下降。
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