目的:通过结扎巩膜上静脉建立慢性高眼压大鼠模型,为进一步研究青光眼视神经损害的病理机制奠定基础。
方法:通过手术结扎成年SD大鼠左眼2条巩膜上静脉建立大鼠慢性高眼压模型。于术后1周、2周、4周、8周、16周和24周,分别用Goldmann压平眼压计测量双眼眼压(intraocular pressure,IOP),裂隙灯检查双眼眼前节情况、直接眼底镜观察眼底并拍摄眼底照片。于上述各期分别摘除大鼠双眼眼球,常规切片,HE染色,光镜下观察并测量后极部内层视网膜的厚度和计数视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)层细胞的密度;视神经横断切片甲苯胺蓝染色,光镜下观察视神经轴突情况,并用图像分析软件进行轴突计数。
结果:
1. 34只大鼠手术后24只大鼠手术眼眼压升高,成模率为70.59%,至各期实验结束,双眼眼前节未见明显角膜水肿、房水混浊、虹膜脱色素等并发症。
2. IOP测量结果:术前双眼IOP差异无显著性意义。术后即刻实验眼眼压为33.96±1.93mmHg,而对照眼为19.24±1.16mmHg;术后1周,实验眼IOP降至30.80±1.50mmHg, 此后实验眼IOP逐渐下降,至术后24周,实验眼IOP平均稳定在26mmHg左右。分别与同期对照眼相比,差别均有显著性意义(P<0.05)。
3. 光镜观察结果:(1)内侧视网膜厚度:实验眼术后1-4周,其后极部内侧视网膜厚度与对照组相比,差异无显著性意义(P>0.05);实验眼术后8-24周,随着实验时间的延长,其内侧视网膜厚度逐渐变薄,与对照眼相比,差异均有显著性意义(P<0.05)。(2)后极部RGCs层细胞相对密度:随着实验时间的延长,实验眼后极部RGCs层细胞相对密度逐渐下降,至术后24周,RGCs层细胞数减少约36%;术后4周-24周,实验眼后极部RGCs层细胞相对密度低于同期对照眼,经统计差异有显著性意义(P<0.05)。
4. 视神经轴突图像分析结果:实验眼视神经甲苯胺蓝染色的轴突数量逐渐减少,术后8周-24周,实验眼甲苯胺蓝染色的轴突数量低于同期对照眼,经统计差异有显著性意义(P<0.05)。
结论:通过结扎大鼠单眼2条巩膜上静脉,可获得大鼠慢性高眼压模型。慢性高眼压眼RGCs层细胞数量减少,内侧视网膜厚度变薄,视神经轴突数量减少。
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