重组质粒AAV -CNTF的构建和鉴定


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重组质粒AAV -CNTF的构建和鉴定

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重组质粒AAV -CNTF的构建和鉴定

作者：朱益华 … 文章来源：福建医科大学附属第一医院 350005 点击数：更新时间：2004-6-12

目的用基因工程技术克隆大鼠睫状神经生长因子基因CNTF片段,并构建腺相关病毒表达载体。方法采用基因拼接的方法拼接出大鼠CNTF的功能片段，将所得的DNA片段经SalⅠ和XbaⅠ双酶切后用T4DNA连接酶与腺相关病毒载体AAV-MCS质粒连接，然后导入XL10-GOLD超级感受态细胞，筛选出阳性转化子。并用PCR扩增和DNA测序的方法对重组DNA进行鉴定。结果经PCR扩增和DNA测序证实，本实验构建的重组质粒目的基因为大鼠CNTF功能片段。结论本实验成功地克隆了CNTF基因并构建了其腺相关病毒表达质粒，为进一步研究用CNTF基因转染的方法来促进视神经损伤修复奠定了基础。

会议投稿录入：毛进责任编辑：毛进

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