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兔视网膜节细胞的逆行示踪标记         
兔视网膜节细胞的逆行示踪标记
作者:刘金华  … 文章来源:广西医科大学第一附属医院眼科 530021 点击数: 更新时间:2004-6-15
目的 探讨兔视网膜节细胞逆行示踪标记的方法。方法11只2周龄的中国黑色家兔,体表定位,用微量注射器,在6只黑兔的双上丘缓慢注入3%荧光金5μl,5只黑兔双上丘注入2%辣根过氧化物酶5μl。1只荧光金标记的黑兔,马上处死,打开颅腔,观察标记点是否仅限于上丘。10只黑兔标记注射后48h-72h,过量麻醉处死,取兔视网膜及上丘组织行冰冻切片、视网膜铺片、视网膜节细胞培养。荧光金标记者,用荧光显微镜观察。辣根过氧化物酶标记者,用H2O2-DAB染色,在显微镜下观察。结果 标记注射后即刻,肉眼观察见荧光染料局限于上丘核团内,上丘组织的冰冻切片,显微镜下见辣根过氧化物酶仅限于上丘内的注射区。视网膜切片和铺片上,可见荧光呈聚集性地分布于视网膜节细胞中。切片上,辣根过氧化物酶标记的视网膜节细胞显示不佳,但视神经显示清楚。铺片上,辣根过氧化物酶标记的视网膜节细胞显示清楚。培养中,视网膜节细胞的胞体及锥突均显荧光,接种后28天仍可见荧光。辣根过氧化物酶标记的视网膜节细胞生长不良。结论 采用体表定位的方法,可准确的将神经示踪物标记注射到兔的上丘。视神经轴浆流和铺片上视网膜节细胞的示踪标记中,辣根过氧化物酶优于荧光金。切片上和培养的视网膜节细胞的踪标记,荧光金优于辣根过氧化物酶。
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