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R-AAV介导NAP转染兔虹膜色素上皮细胞及其对细胞的保护作用         
R-AAV介导NAP转染兔虹膜色素上皮细胞及其对细胞的保护作用
作者:佘华宁  … 文章来源:西安交通大学第二医院眼科 710004 点击数: 更新时间:2005-6-27 10:58:02
. 【目的】构建NT4-NAP 融合基因并探讨对兔虹膜色素上皮细胞的保护作用。【方法】采用非对称互补引物/模板法,制备两端含有酶切位点的NAP的cDNA,将其连接到神经营养素4(NT4)的的信号肽与前导序列的3,端,组成融合基因NT4-NAP,利用基因重组技术,包装重组腺病毒r-AAV-NAP。采用酶消化加机械分离的方法培养兔虹膜色素上皮细胞。将重组腺病毒r-AAV-NAP转染于培养的兔虹膜色素上皮细胞,设置未转染兔虹膜色素上皮细胞对照组,观察NAP对兔虹膜色素上皮细胞的作用。【结果】采用MTT法测定,转染重组腺病毒r-AAV-NAP的兔虹膜色素上皮细胞组增殖明显。采用流式细胞仪检测,转染重组腺病毒r-AAV-NAP的兔虹膜色素上皮细胞组凋亡率低于未转染组。【结论】 R-AAV-NAP对兔虹膜色素上皮细胞具有保护作用。
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