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| 一氧化氮和一氧化碳在人眼小梁细胞中的相互调节 |
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作者：李涛 张… 文章来源：华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科 430030 点击数：1614 更新时间：2004/5/28 
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| ［目的］ 已有实验证实，人眼小梁细胞中同时表达一氧化氮合成酶（nitric oxide synthases，NOS）和一氧化碳合成酶（血红素氧合酶，heme oxygenase，HO）。那么小梁细胞中是否存在由气体分子一氧化氮（nitric oxide，NO）和一氧化碳（carbon monoxide，CO）构成的一种信号调节网络？本实验探讨了体外培养人眼小梁细胞中NO和CO的相互调节。
［方法］ 体外培养人眼小梁细胞并用第4代。向细胞培养液中加入不同浓度的一氧化氮供体硝普钠（sodium nitroprusside，SNP），RT-PCR检测小梁细胞一氧化碳合成酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）mRNA，分光光度法检测培养液中碳氧血红蛋白（carbon monoxide hemoglobin，HbCO）含量作为内源性CO产量的指标；加入HO-1诱导剂氯化血红素（hemin）和HO-1抑制剂锌原卟啉IX（zinc protoporphyrin IX ，ZnPP-IX）预处理细胞后，再向细胞培养液中加入NOS底物左旋精氨酸（L-arginine，L-Arg），Western blot免疫印迹技术检测诱导型一氧化氮合酶（inducible NOS，iNOS）蛋白的表达，酶法检测培养液中NO生成量，MTT法检测细胞存活率，流式细胞仪检测细胞凋亡指数。
［结果］ SNP作用小梁细胞，HO-1mRNA表达和CO生成明显增加。Hemin预处理细胞可明显降低L-Arg对小梁细胞iNOS蛋白的诱导，减少NO的产生，增加小梁细胞的存活率，减少小梁细胞凋亡，而ZnPP-IX预处理细胞进一步增加了L-Arg对小梁细胞iNOS蛋白的诱导及NO的产生，更加重了小梁细胞的损伤。
［结论］ NO对小梁细胞HO-CO系统有正反馈调节作用，而小梁细胞HO-CO系统对NOS-NO系统有负反馈调节作用。NO-CO调节途径的意义可能是NO通过CO的反馈抑制自身的细胞毒性作用，而又通过CO产生cGMP保持小梁网的舒张，从而清除NO产生的过氧化物，避免小梁细胞过氧化，在维持机体稳态中具有重要的病理生理意义。
［关键词］ 小梁网； 细胞培养； 一氧化氮； 一氧化氮合酶； 一氧化碳； 血红素氧合酶
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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