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氧化应激状态下人眼小梁细胞血红素氧合酶-1的表达及其抗氧化损伤作用 |
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作者:李涛 张虹 文章来源:华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科 430030 点击数:1584 更新时间:2004/5/28
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[目的人类小梁组织是房水排出的主要途径和调节眼压的主要组织。随着年龄的增长,尤其在眼部遭受光损伤、代谢异常和发生炎症病理过程时,房水中的活性氧含量明显增加,超过小梁细胞耐受水平,引起细胞形态和生理功能的改变,进而可诱发青光眼。血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)是近年来发现的一种可被氧化应激所诱导,并对机体具有保护作用的热休克蛋白,被称为“细胞保护的旗帜”。本研究旨在探讨探讨体外培养人眼小梁细胞在氧化应激状态下血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的表达及其抗氧化损伤作用。
[方法] 体外培养人眼小梁细胞并用第4代。向细胞培养液中加入过氧化氢(H2O2),逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot免疫印迹技术检测小梁细胞HO-1mRNA和蛋白的变化。分别预先加入HO-1诱导剂氯化血红素(hemin)和抑制剂锌原卟啉IX(zinc protoporphyrin IX ,ZnPP-IX)1h后,通过MTT法检测小梁细胞在400µmol/L H2O2作用时的存活率。
[结果] H2O2可浓度依赖性诱导小梁细胞HO-1mRNA和蛋白表达升高。Hemin可浓度依赖性地提高小梁细胞在H2O2作用时的存活率,ZnPP-IX则浓度依赖性地降低小梁细胞在H2O2作用时的存活率。
[结论] 氧化应激状态下人眼小梁细胞HO-1表达升高,HO-1的诱导表达是一种细胞适应性调节机制,细胞可以通过这种机制来缓解氧自由基引起的严重细胞损伤。
[关键词] 小梁网; 细胞培养; 血红素氧合酶-1; 氧化应激 |
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会议投稿录入:毛进 责任编辑:毛进 |
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