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| 反义c-myc基因转染抑制永生化晶状体上皮细胞增殖的实验研究 |
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作者：孙洁 谢… 文章来源：山东省眼科研究所 266071 点击数：1390 更新时间：2004/5/28 
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| 目的 观察腺病毒携带的反义c-myc基因（Ad-AS-myc）转染对体外培养的永生化人晶状体上皮细胞（HLEC）的增殖、凋亡、细胞周期及c-myc基因表达的影响。 方法 （1）按照感染强度100将Ad-LacZ转染HLEC，48h后X-Gal染色检测转染效率。（2）按照感染强度100将Ad-AS-myc转染HLEC，观察细胞形态变化；采用生长曲线法、MTT比色法分析细胞增殖改变；转染后48、96h，流式细胞仪测定细胞凋亡变化（Annexin-V Kit法）、分析细胞周期改变（DNA倍体法）；同时检测细胞c-myc mRNA和蛋白产物表达的变化（RT-PCR，Western Blotting）。 结果 （1）重组腺病毒转染效率为80%。（2）Ad-AS-myc转染HLEC后，细胞由贴壁生长的梭形、星形或多角形变为圆形，逐渐脱壁。转染后24h，细胞的增殖受抑，48、72、96h时增殖程度进一步减弱，与未转染组相比，差异均有显著性（P均为0.000）。转染后48、96h，凋亡细胞比例明显升高，分别为18.33%和26.93%，与未转染组3.19%和1.75%相比，均有显著差异（P均为0.000）。转染后48、96h，细胞出现G1期阻滞现象，表现为G1期细胞比例增加及S期细胞比例减少，与未转染组相比，差异均有显著性（P均<0.05）。RT-PCR和Western Blotting检测发现，转染后c-myc mRNA和蛋白产物水平特异性下调。 结论 Ad-AS-myc在体外可特异性抑制永生化人晶状体上皮细胞c-myc基因的表达，诱发细胞周期G1期阻滞现象，从而有效抑制该细胞增殖，诱导该细胞凋亡。
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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