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VEGF siRNA质粒转染人脉络膜黑色素瘤细胞后VEGF的表达和细胞增殖研究 |
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作者:刘海燕 … 文章来源:上海交通大学医学院附属第九人民医院眼科 200011 点击数:1311 更新时间:2006/6/30 0:33:28
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目的 研究VEGF siRNA质粒转染人脉络膜黑色素瘤OCM-1细胞后VEGF的表达及细胞增殖的情况,探讨VEGF siRNA抑制OCM-1细胞生长的意义。方法 体外培养人脉络膜黑色素瘤OCM-1细胞。快速大量抽提VEGF siRNA表达质粒 p1.0CMV-VEGF siRNA,质粒经脂质体LipofectamineTM 2000转染OCM-1细胞,RT-PCR和ELISA检测转染后VEGF mRNA及VEGF蛋白被抑制的情况。MTT法检测p1.0CMV-VEGF siRNA转染OCM-1细胞后,细胞增殖和凋亡的情况。结果 p1.0CMV-VEGF siRNA质粒转染OCM-1细胞24小时后,其对OCM-1细胞内源性VEGF mRNA表达的抑制率约为54%,转染48小时、72小时后抑制率逐渐减弱。ELISA检测显示,转染24小时后VEGF 蛋白表达仅为空质粒对照组的47.2%。OCM-1细胞被VEGF siRNA转染后,MTT法示p1.0CMV-VEGF siRNA组细胞增殖较其他对照组受抑制。结论 采用RNA干扰技术,质粒p1.0CMV-VEGF siRNA经脂质体转染OCM-1细胞后,可以抑制VEGF mRNA和VEGF蛋白的表达,有望为CM治疗提供一种新方法。 |
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会议投稿录入:liuhy136 责任编辑:毛进 |
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