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| Caspase-9在RCS大鼠视网膜的时空表达及其抑制剂对感光细胞凋亡保护作用的实验研究 |
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作者：朱晓波，… 文章来源：中山大学中山眼科中心 510060 点击数：1143 更新时间：2006/6/30 12:13:02 
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| [摘 要] 目的：观察caspase-9在RCS大鼠视网膜的时空表达及其抑制剂对大鼠感光细胞凋亡的影响，探讨caspase-9及其抑制剂在感光细胞凋亡和凋亡保护中的作用。方法：44只健康RCS大鼠分两大组：第一大组12只再随机分4组，15、20、25、30 d各3只；第二大组全部18d，随机分4小组共32只，分别在20、25、30、35 d时被处死。第一组实验及其对照大鼠在检查ERG后处死取视网膜行caspase-9的免疫组化、荧光活力分析、Western blot及凋亡TUNEL检测。第二组先随机抽8只行单眼ERG检查，之后立即单眼玻璃体内注射Z-LEHD- FMK 4μg，对照眼注等量2%DMSO。注药后在上述相应处死时间点检查双眼ERG后摘除双眼球，行H-E染色及TUNEL检测，透射电镜观察视网膜超微结构。结果：第一组RCS大鼠在25d ERG接近熄灭型。TUNEL阳性细胞只在RCS大鼠外颗粒层表达，25d最明显。25d后RCS大鼠感光细胞内节可见明显caspase-9阳性表达，20d caspase-9表现出最大活力(10.98±0.13)ρmol/mg/min。Western blot分析显示caspase-9裂解条带在20d时最明显。第二组注入Z-LEHD-FMK后，25d时实验眼ERG 的b波振幅达最大( 137.35±7.41 )mV，35d时仍能检测到，而对照眼25d及以后各组ERG接近熄灭型。实验眼35d时外颗粒层强荧光的凋亡阳性细胞才更明显，对照眼则在25d已很明显并持续到35d。光镜下30d实验眼外颗粒层细胞数7～8层，视网膜无明显变薄，对照眼2～4层，整个视网膜变薄。透射电镜下25d对照眼部分感光细胞胞核核仁固缩；17d实验眼及对照眼均见较多的感光细胞呈现凋亡改变。结论：caspase-9在感光细胞凋亡调控中发挥重要作用，Z-LEHD-FMK在适宜的时机应用能够延缓RCS大鼠感光细胞凋亡。
本研究接受国家自然科学基金(No. 30200307)及广东省医学科技基金资助(No. B2002045)
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| 会议投稿录入：zxb98 责任编辑：毛进 |
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