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纳米RNA干扰VEGF及受体表达对氧诱导的视网膜新生血管增殖的影响 |
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作者:郭晓会,… 文章来源:中山大学中山眼科中心 510060 点击数:913 更新时间:2006/6/30 16:50:58
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目的: 研究纳米RNA干扰VEGF及其受体VEGFR-1和VEGFR-2表达对氧诱导的小鼠视网膜新生血管增殖的影响。
方法:设计和合成以VEGF及受体为靶基因的siRNA(称为siMix),以荧光素酶(luciferase)基因 (称为siLuc)作为对照。建立氧诱导的血管增殖性视网膜病变小鼠模型。出生后12d和13d分别经玻璃体腔和腹腔注射siMix和siLuc;一眼注射siMix,另一眼注射siLuc。生后17d取鼠眼做冰冻切片和Lectin染色或荧光素灌注后做视网膜平铺片,定量计算视网膜新生血管的面积;同时用RT-PCR和ELISA分别检测14d和17d视网膜VEGF及VEGFR-1、VEGFR-2的mRNA水平和蛋白质水平。
结果: 玻璃体腔和腹腔注射组分别与对照组比较:视网膜平铺片检测新生血管面积分别从(0.310±0.069)mm2/眼, (0.649±0.200)mm2/眼降到(0.129±0.050)mm2/眼,(0.312±0.129)mm2/眼;冰冻切片检测新生血管面积从(0.272±0.084)mm2/眼,(0.314±0.079)mm2/眼降到(0.182±0.057)mm2/眼,(0.164±0.047)mm2/眼(各p<0.05)。17d视网膜表达VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2蛋白水平,玻璃体腔注射组较对照组分别减少24%,22%,17%;腹腔注射组减少17%,19%,15%;两种给药方式间无统计学差异。17d视网膜表达上述基因的mRNA水平也较对照组明显降低(p<0.01)。
结论:针对VEGF及其受体的多位点纳米RNA干扰技术可更有效地抑制视网膜血管增殖,是治疗视网膜新生血管的新途径;载体联合纳米RNA技术腹腔注射,可提高转染率,减少全身并发症,是非常有前途的基因治疗方法。
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会议投稿录入:gxh968 责任编辑:毛进 |
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