|
| 恒河猴皮肤干细胞的体外培养纯化与鉴定 |
|
作者：卢蓉 黄丹… 文章来源：中山大学中山眼科中心 点击数：1321 更新时间：2006/7/2 20:28:51 
|
|
| 目的：探索恒河猴皮肤干细胞的体外培养及纯化条件，为进一步的研究奠定基础。
方法：通过组织块培养法和消化培养法在体外培养恒河猴表皮细胞，然后用IV型胶原吸附法吸附20分钟，获得快吸附细胞，对快吸附细胞进行克隆培养，并进行免疫组化双标、RT－PCR鉴定β1整合素和角蛋白15的表达，用流式细胞仪鉴定纯化前后的细胞中β1整合素和角蛋白15的阳性细胞比例，并通过透射电镜观察细胞的超微结构。
结果：组织块培养法和消化培养法均可获得表皮细胞，IV型胶原纯化后的细胞胞体较小，饱满，核/浆比例大，细胞镶嵌状排列。细胞克隆分析显示细胞全克隆生长率高，细胞免疫荧光显示分选后的细胞显示β1整合素和角蛋白15阳性，RT－PCR检查呈现β1整合素和角蛋白15的特异性片断，流式细胞仪检查显示纯化前的细胞中角蛋白15阳性细胞占总细胞中的比例为8％，β1整合素阳性细胞的比例为10.7％；纯化后，角蛋白15阳性细胞的比例为89.4％，β1整合素阳性细胞的比例为88.5％。
结论：通过组织块培养法和消化培养法均可培养获得活性良好的表皮细胞，IV型胶原吸附法是一种简便、有效的皮肤干细胞分离方法，可以为进一步的眼表上皮替代重建眼表提供足量的高纯度的干细胞。
|
|
|
| 会议投稿录入：ronglu 责任编辑：毛进 |
|
|
上一篇会议投稿： 高能超脉冲CO2激光治疗睑缘肿物的疗效观察
下一篇会议投稿： 130例泪腺上皮性肿瘤的诊断 |
|
|
| 【字体：小 大】【发表评论】【加入收藏】【告诉好友】【打印此文】【关闭窗口】 |
|
网友评论：（只显示最新10条。评论内容只代表网友观点，与本站立场无关！）