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| 视网膜石蜡切片Rhodopsin和CRALBP不同抗原修复方法的比较观察 |
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作者：李颖 胡… 文章来源：北京大学第三医院眼科中心 100083 点击数：1673 更新时间：2007/5/10 12:43:39 
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| 目的：视紫红质（Rhodopsin）和胞内视黄醛结合蛋白（cellular retinal-binding protein,CRALBP）是视网膜感光细胞和视网膜色素上皮细胞重要的功能蛋白，在研究视网膜细胞功能变化中是重要的观察指标。本研究旨在探讨对视网膜石蜡切片进行免疫组化检测时，这两种抗原的修复方法，并观察脱色素对抗原表达检测的影响。
材料与方法：
1） 新西兰白兔3只，取单侧正常眼。4%多聚甲醛固定，冰冻切片，Rhodopsin和CRALBP免疫组化，DAB显色。
2） 青紫兰兔6只，取单侧正常眼。多聚甲醛与戊二醛的混合液固定，石蜡切片，脱色素，分别采用微波法、高温水浴法、高压法及胰酶消化法等抗原修复方法进行Rhodopsin和CRALBP免疫组化，DAB显色观察。
将各种抗原修复后的免疫组化效果进行比较，并与冰冻切片的结果进行对比。
结果：
4种抗原修复方法中，微波和高温水浴的方法效果不稳定，背景干扰大并有组织脱失。高压法虽然抗原修复效果较好，背景干扰小，但组织也易脱失。而胰酶抗原修复的效果最稳定，抗原表达强，背景清晰，组织破坏不明显。
结论：
对兔视网膜石蜡切片Rhodopsin和CRALBP的免疫组化检测，采用胰酶进行抗原修复，是一种稳定可靠的方法。该技术可用于对视网膜感光细胞和RPE细胞的功能研究。
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| 会议投稿录入：梦思雨 责任编辑：毛进 |
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