[摘要] 目的 探讨高糖环境下白细胞介素-1(IL-1ß)对视网膜Müller细胞谷氨酰胺合成酶的影响并对可能机制进行探讨。方法 将体外培养的大鼠Müller细胞随机分为对照组(5 mMol/l 葡萄糖)和实验组(25 mMol/l 葡萄糖),分别以不同浓度的IL-1ß(0,0.1,1,5,10ng/ml)刺激24h后,采用间接免疫荧光法和Western蛋白印迹法检测两组细胞内谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS) 和即早基因c-Jun的表达变化,使用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染色法测定两组细胞凋亡的情况。结果 细胞免疫荧光组化法和Western蛋白印迹法检测显示在高糖环境下就有Müller细胞GS表达下降、IL-1ß和c-Jun表达的升高(P<0.05); IL-1ß刺激24h后,对照组和实验组Müller细胞中GS的表达都随IL-1ß刺激浓度升高而逐渐降低同时c-Jun的表达随IL-1ß刺激浓度的增加而升高,这一结果在高糖状态下尤为明显;流式细胞仪检测显示不同浓度的IL-1ß刺激24h后,两组细胞随着IL-1ß浓度的增加凋亡率明显升高,在高糖环境下细胞凋亡率的增加更加明显,有统计学意义。 结论 模拟糖尿病状态下,免疫相关因子IL-1ß可使GS表达下降,从而影响了谷氨酸的循环,可能间接引起神经节细胞的死亡,出现早期神经视网膜功能的障碍。其可能机制为IL-1ß激活了c-Jun途径而影响GS的功能。 |