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高糖对体外培养的大鼠视网膜Müller细胞的影响 |
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作者:沈玺* … 文章来源:上海交通大学附属瑞金医院 200025 点击数:932 更新时间:2007/5/19 9:21:09
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[摘要] 目的 探讨高糖对体外培养的大鼠视网膜Müller细胞的活性和谷氨酸代谢功能有否改变及其可能机制。方法 将体外培养的大鼠Müller细胞随机分为正常葡萄糖组(5mMol/l)和高糖组(25mMol/l),培养24h后MTT自动比色法测定两组细胞的活性情况,采用间接荧光免疫组化法和western blot 蛋白印迹法检测两组细胞胶质纤维酸性蛋白(glia fibrillary acidic protein, GFAP)和磷酸化的信号转导及转录活化因子3(phosphorylated signal transducers and activators of transcription3, pSTAT3)的表达情况;采用间接荧光免疫组化法检测两组细胞谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)和c-Jun的表达变化,并用实时定量逆转录聚合酶链反应法(Realtime PCR)检测GSmRNA和c-JunmRNA的表达改变。结果 MTT自动比色法显示高糖状态下细胞活性提高,与对照组相比差异有统计学意义;与对照组相比,高糖组细胞GFAP、pSTAT3和c-Jun的表达都升高,而GS的表达降低,同时GSmRNA的表达降低、c-JunmRNA的表达升高。结论 经高糖处理的Müller细胞活性提高,其可能机制与GFAP和pSTAT3的表达升高有关;同时发现GS的表达下降,可能机制为激活了c-Jun基因。Müller细胞由于谷氨酸循环中的关键酶GS的表达减少而代谢谷氨酸的能力下降,这可能是糖尿病视网膜病变中导致神经节细胞死亡的原因之一。 |
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会议投稿录入:carl_shen 责任编辑:毛进 |
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