| 目的: 构建P88Q突变型GJA8基因真核表达质粒, 并在Hela 细胞中表达以研究蛋白的定位特点，初步了解其致白内障机制。
方法:将野生型和突变型GJA8基因定向克隆到真核表达质粒pEGFP-N1上, 得到pEGFP-N1- GJA8和pEGFP-N1- GJA8 P88Q重组表达质粒, 再用限制性内切酶消化和DNA 测序鉴定, 最后用脂质体包埋转染法转染Hela 细胞, 用荧光显微镜观察它们在Hela细胞内的表达和定位。
结果: 经酶切和DNA 序列测定证实重组质粒构建成功。GJA8基因能在Hela 细胞中表达，野生型表现为膜聚集，而突变型则表现为不规则的分布在胞浆中。
结论: 成功构建P88Q突变型GJA8基因真核表达质粒pEGFP-N1- GJA8 P88Q, 并能有效表达, 其表达的蛋白定位在细胞质，这为进一步研究白内障发病机制奠定了基础。
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