| 目的 探讨姜黄素（curcumin, CUR）对人晶状体上皮细胞株SRA01/04（human 1ens epithelial cell line SRA01/04，HLEC SRA01/04）增殖的抑制作用及其剂量-效应与时间-效应的关系。方法 ⑴ 细胞培养：将冻存的HLEC复苏后，置于含10%小牛血清的DMEM培养基中培养，收集指数生长期细胞进行以下实验；⑵ 四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)比色法分别测定不同浓度（0、5、10、20、30mg/L）的CUR作用于HLEC不同时间（12h、24h、48h）后细胞生长抑制的情况；⑶ 流式细胞术（flow cytometric analysis, FCM）分别检测不同浓度（0、5、10、20、30mg/L）的CUR作用于HLEC 24h后早期细胞凋亡率的情况；⑷ 倒置生物相差显微镜及DAPI免疫荧光染色（4,6–diamidino-2-phenylindole dihydro-chloride，DAPI）分别观察不同浓度（0、5、10、20、30mg/L）的CUR作用于HLEC 24h后的形态学改变；⑸ 免疫组织化学分别观察不同浓度（0、5、10、20、30mg/L）的CUR作用于HLEC 24h后Caspase-3蛋白的表达情况。实验结果进行统计学分析。结果 ⑴ MTT比色法实验结果显示，作用12h和24h：20mg/L和30mg/L浓度组对HLEC有明显的抑制作用；作用48h：10mg/L、20mg/L、30mg/L浓度组对HLEC有明显的抑制作用；随药物浓度增加，HLEC生长抑制率增加，差异有统计学意义（P <0.05）。5mg/L和10mg/L浓度组：生长抑制率48h和24h>12h(P均<0.05),但24h与48h间差异无统计学意义（P >0.05）；20mg/L浓度组：生长抑制率48h>24h>12h(P均<0.05)；30mg/L浓度组：生长抑制率48h>24h和12h(P均<0.05)，但12h与24h间差异无统计学意义（P >0.05）；随作用时间延长，HLEC生长抑制率增加，差异有统计学意义（P <0.05）。0.1%DMSO对照组：生长抑制率12h、24h、48h间差异无统计学意义（P >0.05），提示0.1%DMSO对照组经过48h作用后，HLEC生长抑制率无明显变化。⑵ FCM检测表明，不同浓度的CUR作用于HLEC 24h后，早期细胞凋亡率均随浓度增加而明显增加，呈剂量-效应关系，其顺序为浓度30mg/L组>20mg/L组>10mg/L组>5mg/L组和空白对照组,各组间差异有统计学意义（P <0.05），但5mg/L浓度组和空白对照组间差异无统计学意义（P >0.05）。⑶ 不同浓度的CUR作用于HLEC 24h后观察细胞形态学改变，倒置生物相差显微镜下可见细胞体积缩小、细胞皱缩、细胞浆可见大量空泡、细胞核裂解；DAPI免疫荧光染色可见细胞核固缩、溶解碎裂、产生凋亡小体，呈现细胞凋亡的形态学改变，且随药物浓度增加，上述变化更加明显。而对照组细胞形态规则，细胞核呈现均匀的荧光染色。⑷ 免疫组织化学可见随CUR浓度增加，用药组Caspase-3蛋白的表达增强，其增强的顺序为浓度30mg/L组>20mg/L和10mg/L组>5mg/L组>0mg/L组，与空白对照组比较，差异有统计学意义（P <0.05），而20mg/L和10mg/L浓度组间差异无统计学意义（P >0.05）。结论 姜黄素对人晶状体上皮细胞的增殖有抑制作用和诱导其凋亡的作用，且呈明显的剂量-效应与时间-效应关系，可望成为后发性白内障的防治药物。
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