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| 高浓度谷氨酸影响大鼠眼Müller细胞活性的实验研究 |
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作者：李忠恩 … 文章来源：山东中医药大学眼科中心 济南施尔明眼科医院 山东省济南市英雄山路48号 250002 点击数：1115 更新时间：2007/6/11 9:22:04 
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| 目的：研究体外培养的视网膜Müller细胞胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein ,GFAP）和谷氨酰胺合成酶（glutamamine synthetase, GS）在细胞外高浓度谷氨酸的环境下对谷氨酸的转运作用。
方法：1 恒温摇床法纯化体外原代培养的大鼠视网膜细胞，免疫细胞化学法鉴定细胞（GFAP、GS）；HE染色观察细胞形态。 2 在传代早期Müller细胞的培养基内加入高浓度的谷氨酸（1.5mM）分别作用一天、四天，MTT比色法测定细胞的活力，并进行细胞HE染色，观察细胞形态；采用免疫细胞化学染色法观察在高浓度的谷氨酸作用一天后GFAP和GS的表达情况。
结果：恒温摇床法纯化后细胞GFAP、GS均为阳性，且呈现均匀一致的细长形态，突起少，折光性暗，细胞核椭圆形，这与Müller细胞特点相符。高浓度谷氨酸作用细胞一天后，细胞的分裂生长加强，细胞活力增加，细胞形态没有明显变化；GFAP表达明显增加（平均光密度值明显增加），但GS表达没有显著变化。
结论：恒温摇床法是纯化Müller细胞简单有效的方法；在正常状态下，Müller细胞表达GFAP和GS蛋白。GFAP参与谷氨酸的转运，受到刺激后早期表达明显增加。GS是细胞转化谷氨酸的关键酶，受到刺激后早期变化不明显。高浓度谷氨酸的细胞外环境下，Müller细胞对谷氨酸的转运增多，而代谢相对滞后引起谷氨酸代谢紊乱是引起兴奋性毒性作用，造成细胞受损的原因之一。
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| 会议投稿录入：aya610 责任编辑：毛进 |
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