| 目的 研究链脲菌素（streptozotocin，STZ）诱导糖尿病小鼠模型中早期视网膜神经元－特别是胆碱能无长突细胞的丢失以及此过程涉及的细胞凋亡，探讨糖尿病早期视力下降的原因。方法 8周C57BL/6J雄性成熟小鼠按照160mg/kg体重剂量单次腹腔注射溶于新鲜配制枸櫞酸缓冲液STZ。空腹尾静脉血糖14mmol/L以上者定义为糖尿病小鼠。3个月时小鼠眼球行组织病理学检查，冰冻切片TUNEL染色和Hoechst染色观察视网膜各层细胞有无凋亡。制作视网膜铺片，行免疫组化检查胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase, ChAT)抗体染色观察视网膜中胆碱能无长突细胞的分布；活化Caspase-3＋CD31抗体双重染色观察视网膜凋亡细胞与视网膜血管的关系；糖尿病2周、1.5月、3月等不同时间活化Caspase-3＋ChAT抗体双重染色免疫组化检查胆碱能无长突细胞的凋亡情况。结果2周STZ诱导模型成功率为88.57％。冰冻切片HE染色结果显示糖尿病小鼠视网膜各层细胞较对照组排列松散、部分细胞缺失。TUNEL染色和Hoechst染色显示阳性细胞分散在视网膜各细胞层。视网膜铺片免疫组化检查可见胆碱能无长突细胞穿过整个视网膜有规律的分布，细胞体很小，位于内核层和神经节细胞层，其中内核层中较多；凋亡细胞存在于视网膜各细胞层，分散于视网膜血管之间，提示凋亡的视网膜细胞非血管性。凋亡的胆碱能无长突细胞可见于内核层和神经节细胞层，以内核层为多，糖尿病2周时即出现，3个月的观察期内随时间的延长凋亡细胞逐渐增多（F=74.930, P=0.000）。结论 单次腹腔注射STZ（160mg/kg体重剂量）可成功建立糖尿病小鼠模型。糖尿病早期，视网膜各层细胞减少，细胞发生凋亡，此凋亡过程涉及caspase-3依赖性途径。绝大部分凋亡细胞非血管性，特定神经细胞-胆碱能无长突细胞发生凋亡，并呈时间渐进性。
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