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大鼠晶状体生长发育和白内障形成中泛素化蛋白的蛋白质组学研究         
大鼠晶状体生长发育和白内障形成中泛素化蛋白的蛋白质组学研究
作者:王晓贞 刘… 文章来源:中山大学中山眼科中心 510060 点击数:1387 更新时间:2004/5/31
目的 筛选并鉴定大鼠晶状体中泛素的靶蛋白。材料与方法 DEAE离子交换层析制备FractionⅡ;过量牛泛素孵育晶状体组织蛋白;GST-S5a亲和层析获取泛素化蛋白;晶状体泛素化蛋白的不连续SDS-PAGE;选取蛋白条带并将其从胶上切下;凝胶内酶解;基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析得到肽质量指纹谱;数据库检索,鉴定泛素靶蛋白。结果 凝胶上选取6个蛋白条带,共鉴定出了四个蛋白和一个蛋白混合物。它们是胞影蛋白α链、αA晶体蛋白、βB2晶体蛋白和αB晶体蛋白。蛋白混合物为谷胱甘肽S转移酶和26S蛋白酶体S5a亚基。结论 胞影蛋白、αA晶体蛋白、βB2晶体蛋白和αB晶体蛋白是大鼠晶状体中泛素的靶蛋白,它们可通过泛素蛋白酶体途径降解。
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