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    SiRNA 沉默CTGF基因表达对牛角膜内皮细胞增殖的影响         
    SiRNA 沉默CTGF基因表达对牛角膜内皮细胞增殖的影响
    作者:陈宏 文章来源:华中科技大学同济医学院附属协和医院眼科 点击数:1027 更新时间:2008/1/17
    摘要 目的 RNA干扰(RNA interference RNAi)技术沉默结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)基因表达对牛角膜内皮细胞增殖的影响。方法 设计并合成CTGF特异性SiRNA( small interfering RNA),用脂质体转染入培养的牛角膜内皮细胞,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法观察基因沉默效果,免疫印迹(Western blot)法观察1.00μg/L TGF-β2作用下角膜内皮细胞内P27蛋白表达。结果 CTGF SiRNA成功转染入培养的牛角膜内皮细胞并有效沉默CTGF mRNA表达,转染24h,48h和72hCTGF mRNA表达分别为正常对照组的17.3%,24.4%和41.7%,与正常对照组比较,其差异有统计学意义(p≤0.05)。在转染36h时P27蛋白表达明显下降(p≤0.05)。结论 CTGF特异性SiRNA能有效沉默细胞内CTGF mRNA表达通过下调角膜内皮细胞P27蛋白的表达,从而抑制TGF-β2 的抗角膜内皮增殖的作用,促进角膜内皮细胞增生修复。
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