目的 探讨组织型谷氨酰胺转移酶(tTG)利用反义寡核苷酸介导技术在体外培养牛眼小梁细胞内表达的变化。方法 根据tTGmRNA序列的二级结构设计两条硫代修饰反义寡核苷酸序列,采用阳离子脂质体介导技术转染体外培养的牛眼小梁细胞,实验分为反义核苷酸A组,反义核苷酸B组和空白对照组。应用RT-PCR和免疫组化法检测tTG在转染前后表达的变化。结果 经脂质体介导的反义寡核苷酸A组,tTG在蛋白和mRNA水平均有显著下降(P<0.05),而反义寡核苷酸B组表达水平无明显下降(P>0.05)。结论 组织型谷氨酰胺转移酶(tTG)作为一种钙依赖性的多功能性蛋白质,可催化γ-谷氨酰胺与赖氨酸ε-氨基的共价交联或催化底物形成多聚体,在维持细胞外基质的稳定方面起着重要作用,可能是原发性开角型青光眼(POAG)的发病因素之一.本实验采用脂质体介导的硫代修饰反义寡核苷酸技术降低tTG在体外培养牛眼细胞内的表达,为治疗原发性开角型青光眼提供了新的思路. |