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胆碱能信号对人视网膜色素上皮细胞自分泌功能的调控         
胆碱能信号对人视网膜色素上皮细胞自分泌功能的调控
作者:谭佳 文章来源:中南大学湘雅医院眼科 点击数:1118 更新时间:2008/1/31
胆碱能信号对人视网膜色素上皮细胞自分泌功能的调控
谭佳 刘双珍
中南大学湘雅医院眼科(湖南长沙,410008)
目的:研究表明TGF-β2与近视眼巩膜重塑密切相关,本研究通过观察卡巴胆碱干预下人视网膜色素上皮细胞系(D407)表达及分泌TGF-β2的时效和量效关系,研究其对人视网膜色素上皮细胞自分泌功能的调控,旨在阐明胆碱能神经递质调控近视眼巩膜重塑的可能机理。
方法:常规培养D407细胞,药物干预前换用无血清培养基培养24小时。分别做如下处理:(1)实验组:加入胆碱能激动剂卡巴胆碱(10-8~10-4mol/L);(2)空白组:不加药物。于处理后2、4、8、16、24、48小时分别采用ELISA、RT-PCR、Western blot法检测细胞上清液及胞浆中TGF-β2 的表达水平,分析时效与量效关系。统计学方法采用重复测量的方差分析。
结果:实验组细胞上清液中TGF-β2含量,胞浆中TGF-β2 mRNA和蛋白质的表达水平均较空白组增加,随卡巴胆碱浓度的增高及作用时间的延长该效应逐渐明显,具有统计学意义;浓度与作用时间无交互作用。
结论:卡巴胆碱可促进视网膜色素上皮合成及分泌TGF-β2,提示胆碱能神经递质可通过此途径调控近视眼巩膜细胞外基质重塑。
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