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神经球蛋白对慢性青光眼小鼠模型中视网膜神经节细胞保护作用的研究         ★★★
神经球蛋白对慢性青光眼小鼠模型中视网膜神经节细胞保护作用的研究
作者:魏欣 陈晓… 文章来源:四川大学华西医院 成都国学巷37号 610041 点击数:772 更新时间:2011/5/13 11:58:00
目的:探讨神经球蛋白对慢性青光眼小鼠模型中视网膜神经节细胞保护作用。方法:(体外)比较Ngb对不同浓度谷氨酸环境下培养的视网膜神经节细胞存活率的影响。(体内)在成年野生型(WT)和神经球蛋白过量表达转基因(Ngb-Tg)小鼠前房内注射荧光微球(MB)以诱导眼压升高。将小鼠分为5组:1.WT小鼠+ 前房注射PBS;2.WT小鼠 + 0天时前房注射MB;3. Ngb-Tg小鼠+ 0天时前房注射MB;4. WT小鼠 + 0天及4周时两次前房注射MB;5. Ngb-Tg小鼠分别+ 0天及4周时两次前房注射MB。诱导高眼压后在不同时间点采用real-time PCR,Western Blot和免疫组化定量分析Ngb在视网膜中的表达变化和视网膜神经节细胞的存活率,并对比不同时间点两组小鼠视网膜中过氧化物和ATP水平以研究Ngb细胞保护作用的基本机制。结果:体外:在不同谷氨酸浓度下,从野生型小鼠中提取的视网膜神经节细胞存活率均明显低于Ngb-Tg小鼠(P<0.05)。 体内:向WT和Ngb-Tg小鼠前房注射MB均诱导持续眼压升高,两次注射MB可诱导高眼压状态8周。WT小鼠早在高眼压第3天呈现Ngb上调的现象,而Ngb-Tg小鼠视网膜中Ngb则一直呈现高表达, 并且在眼压升高后仍维持不变。与眼压升高相关联的是,在第0天, 第4周和第8周,第1组小鼠均没有呈现出明显的RGC凋亡;第2组和第3组相比较, RGC凋亡率在第0天, 第3天无统计学差异;第4组和第5组小鼠相比较,RGC凋亡率在第1,4,8周均有统计学差异。 第3组小鼠视网膜中过氧化物含量远低于第2组,而ATP的含量则远高于第2组小鼠。结论:在青光眼模型中,Ngb可能是内源性神经保护因子,对高眼压所致视网膜神经节细胞的损伤起保护作用,其机制可能是通过降低氧化应激和改善线粒体功能实现的。
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