目的 观察密蒙花总黄酮对去势雄鼠干眼症大鼠模型基础泪液分泌量、泪膜稳定性和凋亡相关基因蛋白Fas、FasL表达的影响,探讨密蒙花总黄酮抗性激素水平失调导致的大鼠干眼症的作用机制。
方法 将1月龄健康雄性Wistar大鼠150只,体重200g左右,采用随机数字法分为A1、B1、C1、D1、E1、A2、B2、C2、D2、E2、A3、B3、C3、D3、E3共15组,每组10只。分别为:A代表:正常组;B代表:假手术对照组;C代表:手术对照组;D代表:雄激素治疗对照组;E代表:密蒙花黄酮治疗组;1代表:饲养1月后;2代表:饲养3月后;3代表:饲养5月后。将C、D、E三组实验鼠切除双侧睾丸及附睾;B组只切开阴囊而不切除睾丸,作为假手术对照组;A组不做任何处理。各组在造模后1周,待伤口基本愈合后开始用药。各组实验动物分别于用药1,3,5个月后随机取10只, 行Schirmer I试验、测量泪膜破裂时间,抽血测定血清睾酮水平,处死各组动物,取双眼泪腺、角膜组织用免疫组织化学的方法对鼠泪腺和角膜组织中凋亡相关基因蛋白Fas、FasL进行检测,用TUNNEL方法检测各组大鼠泪腺凋亡细胞;电镜观察泪腺组织超微结构。
结果 D、E组Schirmer I试验测量值明显高于C组(P<0.05)、泪膜破裂时间明显长于C组(P<0.05),泪腺导管及腺泡上皮细胞中Fas,FasL阳性表达的细胞数均明显低于C组(P<0.0l),泪腺细胞凋亡数量明显低于C组。D、E组间差异无显著性(P>0.05)。
结论 (1)雄激素水平下降可导致干眼症,采用双侧睾丸及附睾切除的方法可成功建立雄激素水平下降所致大鼠干眼症动物模型。(2)细胞凋亡是雄激素缺乏导致干眼症的机制之一,且凋亡相关蛋白Fas和FasL的表达增加是导致泪腺和角膜细胞凋亡的原因之一。(3)密蒙花总黄酮可通过减少Fas和FasL合成,从而抑制细胞凋亡产生同丙酸睾酮治疗干眼病的相似效果。密蒙花总黄酮可能成为治疗干眼病的一个全新药物。
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