目的 利用所建立抗青光眼术后滤过道瘢痕化的中药高通量筛选体系对青光安颗粒剂小规模中药组分库进行阳性组分筛选,检验所建立筛选体系的实用性,初步考察青光安颗粒剂阳性中药组分的分布。
方法 已经建立的筛选体系是Smad3反应性Tenon囊成纤维细胞株TCFS-ZsGreen1DR,含有质粒p4COL1A2-ZsGreen1DR,该质粒是以Smad3顺式作用元件4×COL1A2基序为增强子、以SV40为启动子,以ZsGreen1-DR为报告基因的真核表达载体。以不同溶剂分离联合大孔树脂分离的方法制备青光安颗粒剂小规模中药组分库,共含有39种组分,利用所建立抗青光眼术后滤过道瘢痕化筛选体系,利用24孔板进行荧光平均光密度进行组分筛选。
结果 筛选出平均光密度值之间的差值大于20%的初筛阳性中药组分,共3个组分,分别编号为2-3-3、2-3-4、3-2-3。
结论 成功建立了青光安颗粒剂小规模中药组分库,所含组分38种,为后续研究提供了经验借鉴。利用所建立的筛选体系和24孔板的初步筛选方法,在青光安颗粒剂小规模中药组分库中,筛选出能够抑制TGF-β1效应的中药阳性组分3种,组份编号为2-3-3、2-3-4、3-2-3。证明筛选体系有良好的实用性。 |