目的 研究体外加压培养的视网膜神经节细胞(RGCs)中GSK3β活性变化及其对RGCs存活的影响。
方法 实验研究。混合培养大鼠视网膜神经节细胞(RGCs),分为RGCs对照组,单纯RGCs加压组(60mmHg压力下培养24h),RGCs中加压+10mmol/L氯化锂(Licl ,GSK3β抑制剂)组,RGCs中加压+20mmol/L Licl组。采用免疫荧光方法检测RGCs中磷酸化丝氨酸9位点GSK3β(pS9-GSK3β)的表达情况,MTT检测吸光度值反映RGCs活性,并对数据进行单因素方差分析。
结果 加压组pS9-GSK3β表达的荧光密度(MOD值=0.0570.012)较对照组(MOD值=0.0850.023)明显降低,而加压+10mmol/LLicl组和加压+20mmol/L Licl组pS9-GSK3β表达的荧光密度(MOD值分别为0.0810.016和0.0990.024)均较加压组(MOD值=0.0570.012)增大,且随着Licl浓度的增加,pS9-GSK3β表达的荧光密度增大(MOD值20mmol/LLicl=0.0990.024>MOD值10mmol/LLicl=0.0810.016)。MTT结果显示,加压组吸光度值(OD值=0.1090.016)较对照组(OD值=0.1350.015)显著降低(P<0.05),细胞活性下降;而加压+20mmol/LLicl组中吸光度值(OD值=0.1590.014)较加压组(OD值=0.1090.016)显著升高(P<0.05),细胞活性增高。
结论 压力培养下视网膜神经节细胞中pS9-GSK3β表达减少提示GSK3β活性增强,RGCs活性减低。Licl作为GSK3β的抑制剂,对RGCs有保护作用。
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