目的 检测探讨血小板反应蛋白-1(Thrombonspondin-1 TSP-1)在新生小鼠氧诱导视网膜病变模型小鼠(OIR)视网膜中的表达,探讨及其在视网膜新生血管形成中的作用。
方法 随机选取7日龄C57BL/6J新生小鼠40只,分为模型组(20只)及正常对照组(20只)。模型组小鼠通过高氧诱导的方法建立氧诱导视网膜病变(OIR)的模型。于小鼠出生后第7、9、11日时两组各随机抽取5只小鼠,取视网膜组织采用RT-PCR法检测TSP-1mRNA的表达水平;并于小鼠出生后第117日时两组随机取5只小鼠,运用荧光造影视网膜铺片对视网膜新生血管进行形态学观察。
结果 (1)荧光造影视网膜铺片观察视网膜血管形态:出生后第11日时,正常组小鼠视网膜铺片显示视网膜血管分布呈均匀的网状结构,而模型组小鼠视盘周围可见大片无灌注区,视网膜大血管扩张,仅在周边见毛细血管分布,为典型的OIR病理Ⅰ期表现。(2)RT-PCR检测TSP-1mRNA的结果:正常对照组各时间点小鼠视网膜组织中TSP-1mRNA表达水平各时间点之间表达差异无统计学意义(P>0.05),,模型组各时间点小鼠视网膜组织中TSP-1mRNA表达水平各时间点之间表达差异有统计学意义(P<0.05)。出生后7日d,模型组与对照组小鼠视网膜组织中TSP-1mRNA表达水平无明显差异(P>0.05);出生后9日d,模型组小鼠视网膜组织中TSP-1mRNA表达水平下降(P<0.05);出生后11日d模型组小鼠视网膜组织中TSP-1mRNA表达水平明显低于正常组(P<0.05),且较9日d时模型鼠下降。
结论 在新生小鼠OIR模型视网膜血管生长发育抑制期,视网膜组织中TSP-1mRNA的表达逐渐下降,提示TSP-1可能作为负调节因子在早期即参与视网膜新生血管的形成过程。 |