目的  尽管眼被认为是“免疫赦免”，但移植排斥反应仍是导致角膜移植手术失败的首要原因。如何诱发的前房相关性免疫偏离( anterior chamber associated immune deviation, ACAID )，抑制迟发性变迟发型超敏反应(delayed-type hypersensitivity, DTH )，是抑制角膜移植排斥反应的关键。调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）是一群具有免疫抑制功能的T细胞，在诱发移植耐受和治疗自身免疫性疾病中起到关键作用。本研究的目的是了解Treg诱导小鼠角膜移植免疫耐受的作用机制；探讨具有抗原特异性的Treg的扩增方法；比较天然Treg与获得性Treg对小鼠角膜移植排斥反应免疫调节作用的异同。
方法  1.    低浓度粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte-macrophage colony-stimulating factor，GM-CSF）培养条件下由获得小鼠骨髓来源的树突状细胞（dendritic cells，DCs)，并在0.2ng/ml TGF-β2诱导下培养5d。流式细胞分析术（flow cytometric analysis，FACS）比较DCs与TGF-β DCs的表型不同。2.    ①已摄取供体抗原的自体TGFβ-DCs或PBS经尾静脉注射给小鼠，3d后FACS分析TGFβ-DCs对SPL中Treg数量及表型的影响。②采用免疫磁珠2步法纯化小鼠脾脏CD⁺CD25⁺Treg，并对分离后的细胞表型进行鉴定。3.    Balb/c小鼠分别给予PBS、Natural Tregs和TGFβ-DCs-induced Tregs，尾静脉注射，3d后进行同种异体原位角膜移植，临床观察植片存活时间和排斥曲线；FACS分析移植术后3d小鼠SPL中Treg数目及表型的变化。
结果  1.    TGF-β2诱导DCs维持在不成熟状态。2.    ①TGF-β DC提高了CD4⁺CD25⁺Treg细胞数量和功能。②2步MACS法获得纯度较高并保持天然Treg的表型特征的CD4⁺CD25⁺Tregs。3.    ①TGFβ-DCs-induced Tregs注射组显著抑制了同种异体角膜移植排斥反应：②同种异体角膜移植术后3d，小鼠SPL中CD4⁺CD25⁺、CD4⁺CD25⁺Foxp3、 CD4⁺CD25⁺CTLA-4+、 CD4+CD25+CD28+、 CD4+CD25+CD45RB+、 CD4+CD25+ CD127+细胞比例在PBS注射组、Natural Tregs注射组、TGFβ-DCs-induced Tregs注射组间有显著性差异（P<0.01）。
结论  1.    TGF-β诱导DCs维持在未成熟状态，这种未成熟DCs具有免投抑制作用；TGFβ-DCs在体内可以有效地扩增Foxp3⁺CD4⁺CD25⁺Treg的数目和功能。2.   经诱导产生的Treg具有更强的抑制功能，更有效地抑制了角膜移植排斥反应，而且这种方法在未来临床免疫治疗上具有实用性。