目的 进行性的神经细胞退行病变和巨噬细胞的激活是大多数神经病变的关键病理变化。长期以来,对神经细胞坏死和巨噬细胞激活的活体追踪研究一直受阻于没有理想的无创伤性的研究技术。在本研究中,我们1:使用转基因小鼠建立了直接观察节细胞和巨噬细胞细胞形态的平台;2:定量描述了视神经节细胞树突和轴突的病理变化;3:观察了在视神经挤压伤和视网膜缺血再灌注伤后巨噬细胞的激活;4:并探讨了其和视网膜神经节细胞存活的关系。
方法 本研究应用共焦激光扫描检眼镜观察转基因小鼠的视神经节细胞的树突及轴突形态,巨噬细胞的数量。通过对节细胞胞体面积,轴突直径,树突面积,树突终末分支数量,树突总长度,对称性,胞体和视盘的距离的记录,对节细胞形态和树突轴突的病变模式进行了分析。
结果 在视神经挤压伤模型中,树突最先坏死,其次为轴突和胞体。同样的病变模式在受到90分钟缺血损伤的视网膜中发现。没有在30分钟缺血损伤后观察到神经节细胞的形态学改变。树突收缩速率的变异较大,在挤压伤模型和缺血损伤模型中分别为2.0% 每天和11.7% 每天。树突野面积和收缩速率呈负相关。视网膜巨噬细胞的数量在视神经挤压伤和缺血损伤后1周到达高峰,然后以较慢的速率下降,在4周后下降到接近基线的水平。巨噬细胞的激活水平和损伤程度呈正相关。损伤后4到12周的节细胞数量和巨噬细胞激活程度呈负相关。
结论 本研究表明树突的收缩在视神经挤压伤和视网膜缺血损伤后先于轴突坏死出现。在本研究中我们建立了可以活体直接观察视网膜神经节细胞和巨噬细胞的平台。通过此平台我们可以可靠地检测到早期神经细胞病变。对树突收缩的速率和巨噬细胞的激活水平的测量为我们研究神经退行病变的机制和神经修复的方法提供了新的信息。 |