目的 已知白化豚鼠视网膜中多巴胺含量较三色豚鼠减少,白化豚鼠近视发生率较高,且多巴胺与近视的发生相关,本研究旨在探讨多巴胺合成途径的两个关键酶:酪氨酸羟化酶(TH)和酪氨酸酶(TYR)在不同屈光状态的豚鼠脉络膜及视网膜中的分布和表达情况,以了解多巴胺及其合成酶在眼屈光发育中的作用。
方法 选择2周龄的三色和白化短毛豚鼠,利用红外偏心摄影验光仪测量其屈光状态,A超测量其眼轴,根据屈光状态及眼轴,将三色豚鼠分为近视组(-6.85±1.58D,n=10)和远视组 (6.67±1.34D,n=10),白化豚鼠亦分为近视组(-6.62±0.86D,n=10)和远视组(6.36±1.00D,n=10)。各取10只 (三色远视PH、三色近视PM、白化远视AH、白化近视AM),分别取其左右眼,左眼制备为冰冻切片,以免疫荧光法来确定各种酶在视网膜或脉络膜中的分布。提取右眼的新鲜视网膜组织,用Western-blot方法来检测TH的蛋白含量;提取脉络膜组织,用多巴氧化法来检测TYR的活性,以及Western-blot方法来检测TYR的蛋白含量。
结果 免疫荧光结果显示各组豚鼠视网膜中均有TH表达,主要表达在无长突细胞层;TYR在脉络膜及视网膜色素上皮层表达。Western-blot半定量结果显示各组视网膜中TH含量无统计学差异,各组中TYR含量也无明显的差异。多巴氧化法结果显示PH、PM中的TYR活性明显比AH、AM中的TYR活性高,有统计学差异(P<0.05)。
结论 白化豚鼠较高的近视发生率可能与TYR活性下降导致的多巴胺合成障碍有关。 |