视网膜前体细胞移植治疗视网膜变性模型小鼠

目的定向迁移和整合在细胞替代治疗中作用关键。本研究旨在研究软骨素酶和缺氧预处理对移植的视网膜前体细胞在视网膜变性模型小鼠体内的迁移、整合以及对视功能的影响。
方法鼠视网膜前体细胞和视网膜前体细胞分别取自GFP小鼠和G16-18w流产胎儿的视网膜，鼠视网膜前体细胞体外培养扩增，人视网膜前体细胞在低氧和正常氧状态下培养，鼠视网膜前体细胞联合软骨素酶、生长因子视网膜下腔移植入B6或Rho-/-小鼠体内，人视网膜前体细胞移植入C3H SCID小鼠体内。免疫组化检测细胞的迁移、分化、整合。视网膜电图检测小鼠的视功能恢复。
结果 1.软骨素酶促进了更多的鼠视网膜前体细胞迁移到B6小鼠的视网膜层间。2.联合软骨素酶、IGF1和DAPT移植入Rho-/-小鼠，表达GFAP的细胞数减少，更多的鼠视网膜前体细胞迁移至视网膜内核和外核层，表达recoverin 、rhodospin感光细胞的标志物和synaptophysin整合的标志物。3.人视网膜前体细胞在低氧和常氧状态下均能体现出多潜能性,表达nestin, pax6。低氧下培养，细胞表达Ki-67和CyclinD3增加。4.人视网膜前体细胞能在C3H SCID小鼠体内表达recoverin、crx、opsin感光细胞的标志物以及synaptophysin整合的标志物。5.人视网膜前体细胞移植后3周，C3H SCID小鼠视网膜电图B波明显改善。
结论 1.软骨素酶促进了鼠视网膜前体细胞在B6小鼠中的存活和迁移。2.软骨素酶联合IGF1、DAPT促进了鼠视网膜前体细胞在Rho-/-小鼠中的迁移，分化和整合。3.人视网膜前体细胞具有干细胞的多潜能性，低氧促进了细胞的增殖。4.人视网膜前体细胞在C3H SCID小鼠体内分化为感光细胞，部分改善了小鼠的视功能。