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胰腺炎相关蛋白-16新肽在大鼠内毒素诱导的葡萄膜炎模型中的抗炎作用           ★★★
胰腺炎相关蛋白-16新肽在大鼠内毒素诱导的葡萄膜炎模型中的抗炎作用
作者:杨晓璐 文章来源:上海市第一人民医院眼科 点击数:237 更新时间:2011/9/13
目的 胰腺炎相关蛋白(Pancreatitis-associated protein,PAP)是一类具有抗炎作用的分泌性蛋白质,通过抑制中性粒细胞和巨噬细胞的激活、抑制TNF-α和IL-6的合成以及阻止NF-κB向细胞核内的转录来达到抑制炎症的作用。本研究通过生物信息学方法,从PAP中筛选出一段由16个氨基酸组成的多肽序列,利用体外化学方法合成一种新型多肽PAP-16。本研究的目的是通过大鼠内毒素诱导的葡萄膜炎模型(Endotoxin-induced Uveitis,EIU)观察PAP-16在眼部的抗炎作用。
方法 EIU模型通过对每只Wistar大鼠右足底皮下注射200μgLPS(溶于100μl无菌生理盐水)来诱导建立;正常对照组每只大鼠右足底皮下注射100μl无菌生理盐水;药物干预组每只大鼠在右足底皮下注射200μgLPS的同时,玻璃体腔内分别注射含有1μg,5μg和10μgPAP-16的PBS溶液10μl。LPS刺激24小时后行生物显微镜观察并进行EIU临床评分,收集大鼠房水行炎性细胞计数、房水蛋白浓度测定、ELISA法检测房水中促炎性细胞因子和蛋白(TNF-α、IL-6、ICAM-1和MCP-1)浓度,摘除大鼠眼球进行组织病理学观察,并通过Western Blot检测大鼠虹膜睫状体及视网膜组织中磷酸化NF-κB 的表达量来评估PAP-16在NF-κB通路中所起的作用。
结果 PAP-16(5μg和10μg)能够有效抑制大鼠EIU临床症状、房水炎性细胞浸润、蛋白渗出以及炎性细胞因子和蛋白的表达,且具有剂量依赖性。组织切片观察证实玻璃体腔注射10μg PAP-16能够缓解虹膜睫状体及玻璃体腔炎性细胞的浸润和组织结构的破坏。且PAP-16能抑制NF-κB在虹膜睫状体和视网膜组织中的激活。
结论 本研究证明PAP-16通过抑制NF-κB信号通路的激活,减少促炎性细胞因子和蛋白的表达,从而达到减轻炎症反应、缓解葡萄膜炎临床症状的作用。

 

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