目的 探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对甲状腺相关性眼病(thyroid -associated ophthalmopathy,TAO)患者眼外肌来源成纤维细胞(orbital fibroblasts,OF)细胞外基质(extracellular matrix,ECM)主要成分金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitors of metalloproteinases-1,TIMP-1)、胶原I(collagen type I,COL-I)、胶原III(collagen type III ,COL- III)及纤维连接蛋白(fibronectin,FN)基因表达水平的影响。
方法 采用实时荧光定量逆转录聚合酶连反应(real-time quantitative RT-PCR)观察10µg·L-1TGF-β1刺激OF,在不同时间点(0 h、3 h、6 h、12 h、24 h 、48 h)及不同浓度TGF-β1(1 µg·L-1、5 µg·L-1、10 µg·L-1、20 µg·L-1)刺激OF24 h TIMP-1、 COL-I 、COL III 及FN mRNA表达的变化。
结果 10 µg·L-1TGF-β1刺激OF的时间效应:TIMP-1 mRNA在3 h和6h分别为对照组的1.50倍和2.46倍(P<0.01); COL-I mRNA 在24 h和48 h分别为对照组的5.49、3.69倍(P<0.01);COL-III mRNA在24 h和48 h分别为对照组的2.14、1.63倍(P<0.01);FN mRNA 在12 h和24 h后分别为对照组的2.45、1.53倍(P<0.01)。不同浓度TGF-β1刺激OF 24 h后剂量效应:与空白对照组相比,TIMP-1mRNA 在5 µg·L-1和10 µg·L-1时分别为1.79、1.46倍(P<0.01); COL-I mRNA在1 µg·L-1和10 µg·L-1分别1.94、3.29倍(p<0.01); COL- III mRNA在5 µg·L-1和10 µg·L-1分别1.52、3.28倍(P<0.01); FN mRNA 在1 µg·L-1和10 µg·L-1分别为1.30、2.45倍(P<0.01)。
结论 TGF-β1以剂量和时间依赖的方式刺激OF表达TIMP-1、 COL-I 、COL III 及FN mRNA,TGF-β1可能在TAO眼外肌纤维化机制中发挥了重要的作用。 |