目的 白内障是老年人致盲的主要原因之一,据报道晶状体纤维细胞 (LFC )球体化是白内障形成过程中的重要病理变化之一,钙离子介导的纤维细胞崩坏性球体化可能是造成光线散射中心的原因。钙离子内流( [Ca2+]i )的变化可能是白内障形成的触发关键。因此,降低培养基中的钙离子浓度可能减缓或逆转晶状体纤维细胞球体化过程的发展。我们观察了一种金属螯合剂EDTA以及渗透增强剂MSM在晶状体纤维细胞球体化过程中的作用。
方法 用胰酶消化成年Sprague Dawley大鼠的晶状体皮质分离出单个的晶状体纤维细胞,用光镜观察纤维细胞在不同溶液中的形态变化。分离出的晶状体纤维细胞与含有2mM钙离子的林格氏液混合,引导球体化过程开始,四组等容积的细胞悬混液分别同时与PBS(对照组)、EDTA、甲基磺酰甲烷(MSM)、和EDTA联合甲基磺酰甲烷溶液混合(EDTA及MSM均为美国Chakshu Research Inc.公司提供的专利产品)。其中MSM起着渗透增强剂的作用,能促进细胞摄入EDTA。各组溶液与细胞悬混液混合后,用光镜监测晶状体纤维细胞的形态变化,观察其出现的球体化过程以及群聚为团簇的现象。
结果 各组溶液与晶状体纤维细胞混合1小时以后,EDTA联合甲基磺酰甲烷组以及EDTA组的球体化过程明显被延缓,而单纯甲基磺酰甲烷组与对照组无统计学差异。在处理相同的时间(1小时)以后,我们观察到EDTA联合甲基磺酰甲烷组的晶状体纤维细胞中有较多的单个纤维细胞未发生球体化,而群聚的纤维细胞则相应的减少,与对照组相比有统计学差异,并在此时间以后基本上达到稳定状态。而EDTA组则需要更长的时间(约2小时)达到稳定状态,也与对照组有统计学差异。
结论 联合使用EDTA及甲基磺酰甲烷能有效减慢晶状体纤维细胞球体化过程,预防细胞团簇形成。因此在未来联合金属螯合剂以及渗透增强剂可能成为皮质型白内障的治疗选择。 |