目的 观察研究光损伤诱导RPE细胞的VEGF-A、sFlt-1 和KDR的动态变化,探讨光照对人RPE细胞的VEGF-A及其受体表达的影响。
方法 运用白色荧光灯以(2200±300)Lux光照强度对体外培养的ARPE-19细胞进行光照12h,建立光损伤模型,随机将细胞分为光照处理组及正常对照组,分别于光损伤后0、6、12和24h终止培养,用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western-blot法检测ARPE-19细胞VEGF-A、sFlt-1及KDR的mRNA及蛋白的表达变化。
结果 (1)正常对照组ARPE-19细胞,在0、6、12、24h四个观察时间点VEGF-A、sFlt-1、KDR均有表达,其中,VEGF-A的表达呈升高趋势,在12h达到表达高峰,至24h时表达下降;sFlt-1的表达亦随VEGF-A的变化呈上升趋势,自6h到24h逐渐增加;KDR表达比较平稳,变化不大。(2)光照处理的细胞中,VEGF-A在6h表达量明显增加,高于正常对照细胞,其升高趋势大于正常对照细胞(P<0.05),光照后12h表达最强,明显多于对照组(P<0.05),随后逐渐下降,降低幅度小于对照组;sFlt-1的表达上升趋势明显,在光照后12h达最高峰,较正常对照组显著提高并且提前到达表达峰值(P<0.05),随后24h时明显降低(P<0.05);KDR表达平稳,在光照后12h开始增多,24h时表达升高(P<0.05)
结论 光损伤ARPE-19细胞后VEGF-A表达明显升高,KDR的表达随之小幅度增高, sFlt-1早期随VEGF-A变化显著增加,而后逐渐减少,同时VEGF-A的表达也呈下降趋势。在光损伤模型中,sFlt-1表达显著升高可能以中和VEGF-A的增加,KDR随VEGF-A变化而改变,VEGF-A及其受体之间存在动态变化。
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