目的 通过研究用转化生长因子-β(TGF-β)诱导人Tenon’s囊成纤维细胞(HTF)后,其表达活化素受体样激酶5(ALK5)水平的变化,以探寻青光眼术后滤过道瘢痕化的可能原因。
方法 取眼科手术患者的Tenon’s囊组织进行贴壁培养,获得HTF原代细胞。通过实时荧光定量PCR、蛋白质印迹、细胞免疫荧光染色等方法检测TGF-β受体ALK5的表达情况。
结果 在外源性给予10μg/L TGF-β1诱导1-72h时间后,HTF细胞表达TGF-β受体ALK5基因mRNA的水平呈先上升后下降趋势,其表达量在12小时左右达到峰值。蛋白质印迹结果显示,ALK5蛋白表达水平同样有类似变化趋势,在36小时左右达到峰值。细胞免疫荧光染色结果显示,HTF细胞在36h时ALK5蛋白表达较明显,主要在胞膜及胞质部分有所表达。
结论 在TGF-β诱导后,HTF细胞表达ALK5受体有明显的上调趋势。这可能与青光眼术后滤过道瘢痕化有一定关系 |