目的 观察Janus激酶2抑制剂AG490对高糖诱导的体外培养人晶状体上皮细胞(hLECs)转分化的影响。
方法 用低糖(5.5 mmol/L)培养基体外培养hLECs,采用CCK-8细胞增殖试剂盒检测在高糖(30mmol/L)培养下不同浓度AG490、不同时间(6h、12h、24h、48h)对细胞增殖的影响。分别给予高糖和不同浓度的AG490干预, 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) mRNA的表达;采用细胞划痕试验,观察细胞移行并记录细胞缺损区闭合的时间。
结果 不同浓度AG490处理后,hLECs TGF-β1、FN、α-SMA mRNA表达量明显受到抑制,且呈剂量和浓度依赖性(P<0.05)。划痕试验后,不同时间AG490浓度为50μmol/L处理组的细胞划痕宽度分别恢复14%、19.3%、24.7%、32.7%,AG490浓度为10μmol/L处理组的细胞划痕宽度分别恢复18%、21.3%、31.3%、42%,而高糖组(对照组)划痕宽度分别恢复23.3%、40%、48.7%、64.7%(P<0.05)
结论 1.JAK2抑制剂AG490能抑制高糖诱导的人晶状体上皮细胞间质转分化。2.Janus激酶通路参与上皮转分化过程可能是通过影响TGF-β1和细胞外基质转录表达进行的。 |